目的 探讨整联蛋白α5β1对基底细胞癌(BCC)生长和放疗敏感性的影响及分子机制.方法 采用免疫组织化学染色检测皮肤BCC组织及正常皮肤组织中α5β1的表达差异.将A431细胞随机分为对照A组(细胞正常培养)、pLEX-MCS组(采用含pLEX-MCS的慢病毒转染细胞)、pLEX-α5β1组(采用含pLEX-α5β1的慢病毒转染细胞)、pLEX-α5β1+Gli家族锌指蛋白1(Gli1)抑制剂组(采用含pLEX-α5β1的慢病毒转染细胞,并添加100μmol/L Gli1抑制剂GANT61处理细胞).采用实时荧光定量PCR和蛋白质免疫印迹法检测细胞内α5β1与Gli1的表达情况;采用MTT法和5-乙炔基-2'-脱氧尿苷(EdU)染色检测细胞增殖能力;通过Ho-echst 33258染色观察细胞凋亡形态;采用Transwell实验检测细胞的迁移与侵袭能力.再将A431细胞随机分为对照B组(细胞正常培养)、4 Gy组(采用4 Gy X射线照射细胞)、pLEX-α5β1+4 Gy组(采用含pLEX-α5β1的慢病毒转染细胞,再用4 Gy X射线照射细胞),采用MTT法检测细胞增殖活性,流式细胞术检测细胞凋亡情况.结果 α5β1在皮肤BCC组织中的阳性表达率高于正常皮肤组织(P<0.05).与对照A组和pLEX-MCS组比较,pLEX-α5β1组细胞中α5β1和Gli1 mRNA和蛋白表达水平均升高,细胞存活率升高,EdU阳性细胞率升高,迁移细胞数与侵袭细胞数均增加,差异有统计学意义(P<0.05).与pLEX-α5β1组比较,pLEX-α5β1+Gli1抑制剂组细胞中Gli1 mRNA和蛋白表达水平均下降,细胞存活率降低,EdU阳性细胞率降低,迁移细胞数与侵袭细胞数也均减少,差异有统计学意义(P<0.05).在处理后培养24、48和72 h时,与对照B组比较,4 Gy组细胞增殖活性明显降低(P<0.05);pLEX-α5β1+4 Gy组细胞增殖活性较4 Gy组明显升高(P<0.05).4 Gy组细胞凋亡率较对照B组明显升高(P<0.05);pLEX-α5β1+4 Gy组细胞凋亡率较4 Gy组明显降低(P<0.05).结论 α5β1在BCC组织中高表达,能够促进BCC细胞增殖、迁移及侵袭,抑制细胞凋亡,并降低细胞的放疗敏感性,该作用可能与调控Gli1表达有关.

基底细胞癌;α5β1;Gli家族锌指蛋白1;放疗敏感性

李锦意;黄小辉;范国雄

广东省惠州市第三人民医院皮肤科,广东惠州 516000

国际检验医学杂志

[1]李锦意;黄小辉;范国雄-.整联蛋白α5β1通过介导Gli1表达影响基底细胞癌的生长与放疗敏感性)[J].国际检验医学杂志,2022(23):2917-2924

pLEX,1+Gli,1+Gli1

整联蛋白,基底细胞癌,放疗敏感性,BCC,免疫组织化学染色,皮肤组织,表达差异,A431,MCS,慢病毒转染,锌指蛋白,GANT61,蛋白质免疫印迹,免疫印迹法,MTT,乙炔基,脱氧尿苷,EdU,细胞增殖能力,Ho,echst,Transwell,实验检测,迁移与侵袭,侵袭能力,Gy,1+4,细胞增殖活性,流式细胞术,阳性表达率,蛋白表达水平,细胞存活率,阳性细胞,细胞凋亡率,迁移及侵袭

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