目的 探讨β-连环蛋白(β-catenin)和Yes相关蛋白(YAP)在Klotho蛋白调节硫酸吲哚酚(IS)诱导巨噬细胞极化中的作用.方法 THP-1细胞经丙二醇甲醚醋酸酯处理诱导成THP-1源巨噬细胞,构建Klotho过表达质粒,转染THP-1源巨噬细胞并分为4组.(1)对照组:转染未经处理的pIRES2-ZsGreen1质粒;(2)对照+IS组:转染未经处理的pIRES2-ZsGreen1质粒,并予IS(2 mmol/L)干预;(3)过表达组:转染构建的Klotho过表达质粒;(4)过表达+IS组:转染Klotho过表达质粒并予IS(2 mmol/L)干预.4组细胞采用流式细胞术检测M1极化标志物HLA-DR和M2极化标志物CD206,qRT-PCR法检测β-catenin和YAP mRNA表达水平,Western blot法检测β-catenin、YAP和磷酸化YAP(p-YAP)蛋白表达水平,细胞免疫荧光染色法检测β-catenin、YAP入核率.结果 与对照组比较,对照+IS组HLA-DR标记的阳性细胞百分比明显增加(P<0.01),CD206标记的阳性细胞百分比无明显变化(P>0.05);与对照+IS组比较,过表达+IS组HLA-DR标记的阳性细胞百分比明显减少(P<0.01),而CD206标记的阳性细胞百分比明显增加(P<0.01).与对照组比较,对照+IS组β-catenin mRNA及蛋白表达水平均明显降低,入核率明显下降(均P<0.01);而与对照+IS组比较,过表达+IS组β-catenin mRNA及蛋白表达水平均升高,入核率增加(均P<0.05).与对照组比较,对照+IS组YAP蛋白表达水平明显升高,p-YAP蛋白表达水平明显降低,YAP入核率增加(均P<0.01);与对照+IS组比较,过表达+IS组YAP蛋白表达水平明显降低(P<0.01),p-YAP蛋白表达水平升高(P<0.05).结论 Klotho可通过β-catenin通路抑制IS诱导的巨噬细胞极化.

Klotho蛋白;硫酸吲哚酚;巨噬细胞极化;β-连环蛋白;Yes相关蛋白

李颖;陈进;吕晶;严飞

310013 杭州,浙江医院全科医学科

浙江医学

[1]李颖;陈进;吕晶;严飞-.β-catenin和YAP通路在Klotho蛋白调节硫酸吲哚酚诱导巨噬细胞极化中的作用)[J].浙江医学,2022(04):345-349,354,后插1

+IS

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