典型文献
TAB182维持RPA2 mRNA稳定性促进DNA同源重组修复的研究
文献摘要：
目的:探讨TAB182促进同源重组(HR)修复的相关调控分子及机制。方法:利用shRNA敲低人乳腺癌MCF-7细胞中的TAB182基因，TAB182敲低的MCF-7细胞为沉默组，使用shRNA阴性对照物的MCF-7细胞为TAB182阴性对照组。通过RNA测序分析，筛选与TAB182相关差异表达的HR修复基因。qRT-PCR验证相关基因的mRNA表达，Western blot验证相关蛋白的表达。RAD51和BrdU免疫荧光检测DNA断裂末端形成的3′单链DNA(ssDNA)；流式细胞术检测细胞周期阻滞和细胞凋亡；集落形成实验检测细胞的放射敏感性。结果:RNA测序分析和qRT-PCR验证结果一致，TAB182沉默组细胞中RPA2的mRNA表达降低(
t＝17.97，
P<0.05)。相比于TAB182阴性对照组细胞，TAB182沉默组细胞RPA2在蛋白水平也显著减少。相比于TAB182阴性对照组，TAB182沉默组细胞中RAD51焦点(foci)的表达显著降低；3′ ssDNA结合蛋白标志物BrdU在TAB182沉默组细胞的细胞核中foci形成显著减少。在放射菌素D作用后的第4、8、12 h，相比于TAB182阴性对照组，TAB182沉默组细胞RPA2 mRNA的衰减加快(
t＝5.37、3.79、3.69，
P<0.05)。相比于TAB182阴性对照组，TAB182沉默组细胞放射敏感性增加(
t＝3.48，
P<0.05)；且TAB182沉默组放射诱发的凋亡率显著增加(
t＝11.05，
P<0.05)、照射后24 h的周期阻滞时间延长(
t＝8.40，
P<0.01)。
结论:TAB182通过维持RPA2 mRNA的稳定性，促进RPA2的表达，在DSBs的同源重组修复通路中发挥作用。TAB182的缺失可增强肿瘤细胞的放射敏感性。
文献关键词：
TAB182;RPA2;DNA双链断裂;同源重组修复;放射敏感性
中图分类号：
作者姓名：
李刚;赖淑婷;韩阳;白琛俊;关华;高山山;周平坤
作者机构：
南华大学公共卫生学院，衡阳 421001;军事科学院军事医学研究院辐射医学研究所 北京市放射生物学重点实验室，北京 100850
文献出处：
引用格式：
[1]李刚;赖淑婷;韩阳;白琛俊;关华;高山山;周平坤-.TAB182维持RPA2 mRNA稳定性促进DNA同源重组修复的研究)[J].中华放射医学与防护杂志,2022(04):241-247
A类：
TAB182
B类：
RPA2,同源重组修复,shRNA,敲低,人乳,MCF,测序分析,差异表达,qRT,blot,RAD51,BrdU,免疫荧光检测,单链,ssDNA,流式细胞术,细胞周期阻滞,集落形成,实验检测,放射敏感性,foci,结合蛋白,细胞核,菌素,凋亡率,滞时,DSBs,复通,肿瘤细胞,双链,链断裂
AB值：
0.190806
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