典型文献
shRNA沉默
Sp1对胶质瘤细胞放射敏感性的影响
文献摘要：
目的:探讨下调
Sp1基因表达对胶质瘤细胞放射敏感性的影响。
方法:设计并合成编码shRNA的寡核苷酸序列，克隆入LV3（H1/GFP&Puro）载体中构建重组体。然后重组慢病毒分别感染U251和U87细胞，嘌呤霉素筛选得到稳定转染细胞株。荧光定量RT-PCR和蛋白质印迹法分别检测细胞中Sp1 mRNA和蛋白表达水平；克隆存活法检测细胞存活；流式法检测细胞周期；免疫荧光法检测DNA损伤程度。结果:两株胶质瘤细胞在感染72 h后荧光显微镜观察Sp1慢病毒载体均高表达，RT-PCR和蛋白质印迹法结果显示转染后shRNA-U87和shRNA-U251细胞Sp1 mRMA和蛋白表达量均明显降低（
P＜0.01），Sp1敲除率达90%以上。shRNA-U251和shRNA-U87细胞在10%细胞存活水平下的放射增敏比（SER）分别为1.39和1.18；两株
Sp1敲除组细胞经辐照后G
2/M期比率及γ-H2AX foci数目与对照组相比均极显著增大。
结论:shRNA沉默
Sp1增大了X线诱导的G
2/M期阻滞，加重了DNA双链断裂程度，提高了胶质瘤细胞的放射敏感性。
文献关键词：
shRNA沉默;Sp1基因;胶质瘤细胞;放射敏感性
中图分类号：
作者姓名：
王琦琦;曾家豫;李强;刘雄雄
作者机构：
西北师范大学生命科学学院，兰州 730000;中科院近代物理研究所，兰州 730000
文献出处：
引用格式：
[1]王琦琦;曾家豫;李强;刘雄雄-.shRNA沉默
Sp1对胶质瘤细胞放射敏感性的影响
)[J].中华放射肿瘤学杂志,2022(07):638-642
A类：
B类：
shRNA,Sp1,胶质瘤细胞,放射敏感性,并合,寡核苷酸,LV3,H1,GFP,Puro,重组体,重组慢病毒,U251,U87,嘌呤霉素,选得,稳定转染,细胞株,蛋白质印迹法,蛋白表达水平,活法,细胞存活,细胞周期,免疫荧光法,两株,荧光显微镜观察,慢病毒载体,mRMA,敲除,放射增敏,SER,辐照,G
,H2AX,foci,双链,链断裂
AB值：
0.303046
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