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典型文献
miR-145-5p通过靶向PAK4促进非小细胞肺癌对吉非替尼的敏感性
文献摘要:
目的 研究miR-145-5p通过靶向p21活化激酶(PAK)4对非小细胞肺癌对吉非替尼的敏感性的作用及机制.方法 RT-qPCR检测miR-145-5p mRNA和PAK4 mRNA的表达,利用Lipofectamine2000将miR-NC(miR-NC组)、miR-145-5p mimic(miR-145-5p mimic组)、miR-145-5p inhibitor(miR-145-5p inhibitor组)、pc-PAK4质粒分别或联合转染进入A549/GR细胞,未转染的A549/GR细胞为对照组.噻唑蓝(MTT)法检测细胞活性,流式细胞法检测细胞凋亡,双荧光素酶报告检测靶向关系,Western印迹检测PAK4蛋白相对表达水平.在裸鼠左腋下皮下注射转染过的A549/GR细胞,分为空白组、miR-145-5p mimic组、pc-PAK4组、miR-145-5p mimic+pc-PAK4组.每隔一天给每只小鼠口服吉非替尼(100 mg/kg).第24天颈椎脱位法处死裸鼠,完整取出皮下肿瘤,电子天平称重,RT-PCR检测小RNA和靶基因表达,TUNEL染色检测凋亡.结果 与正常肺细胞BEAS-2B相比,A549和A549/GR细胞中miR-145-5p明显低表达(P<0.01).与对照组相比,miR-145-5p inhibitor组A549/GR细胞活性从24 h开始明显升高,细胞凋亡率明显降低(P<0.01,P<0.05);miR-145-5p mimic组A549/GR细胞活性从36 h开始明显降低,细胞凋亡率明显升高(P<0.01,P<0.05).miR-145-5p对野生型PAK4荧光素酶活性有明显下调作用(P<0.01),对突变型PAK4荧光素酶活性没有明显作用(P>0.05).共转染pc-PAK4明显逆转miR-145-5p高表达对A549/GR细胞作用(P<0.01).miR-145-5p高表达明显减小A549/GR移植瘤体积,减轻A549/GR移植瘤重量,明显上调miR-145-5p mRNA表达,明显下调PAK4 mRNA表达,明显上升细胞凋亡率;共转染pc-PAK4明显逆转miR-145-5p高表达对A549/GR移植瘤作用(P<0.01).结论 miR-145-5p通过靶向PAK4促进非小细胞肺癌对吉非替尼的敏感性.
文献关键词:
miR-145-5p;p21活化激酶(PAK)4;非小细胞肺癌;吉非替尼
作者姓名:
李锋;薛华;王小卫;梁杰;翟梅
作者机构:
咸阳市第一人民医院急诊科,陕西 咸阳 712000;咸阳市第一人民医院老年科二病区,陕西 咸阳 712000;咸阳市第一人民医院呼吸与危重症医学科,陕西 咸阳 712000
文献出处:
引用格式:
[1]李锋;薛华;王小卫;梁杰;翟梅-.miR-145-5p通过靶向PAK4促进非小细胞肺癌对吉非替尼的敏感性)[J].中国老年学杂志,2022(17):4257-4263
A类:
B类:
miR,5p,PAK4,非小细胞肺癌,吉非替尼,p21,qPCR,Lipofectamine2000,NC,inhibitor,质粒,A549,GR,噻唑蓝,MTT,细胞活性,流式细胞法,双荧光素酶,白相,相对表达,裸鼠,腋下,皮下注射,mimic+pc,每隔,颈椎,脱位,处死,整取,电子天平,称重,靶基因,TUNEL,BEAS,2B,低表达,细胞凋亡率,野生型,荧光素酶活性,突变型,共转染,移植瘤,瘤体
AB值:
0.192722
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