目的:探讨人脐带间充质干细胞(hUC-MSC)对糖尿病视网膜病变(DR)模型大鼠视网膜神经节细胞(RGCs)凋亡的影响及对p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)通路的调节作用。方法:取SPF级8周龄SD雄性大鼠45只，采用链脲佐菌素(STZ)腹腔注射联合高糖高脂饮食建立DR大鼠模型，期间每周测量大鼠空腹血糖(FBG)和体质量，采用眼底血管造影观察视网膜血管走行和渗漏情况。将40只建模成功大鼠按照随机数字表法随机分为模型组和hUC-MSC注射组，每组20只；另选取20只正常大鼠腹腔注射等量柠檬酸缓冲液并常规饲养，作为对照组。hUC-MSC注射组玻璃体内注射hUC-MSC，对照组和模型组玻璃体内注射等量磷酸盐缓冲液(PBS)。采用荧光金(FG)逆行示踪标记RGCs观察存活RGCs数目；采用苏木精-伊红染色观察视网膜病理学变化；采用TUNEL法观察RGCs凋亡情况；采用Western blot法检测视网膜组织中B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、p38MAPK和磷酸化p38MAPK(p-p38MAPK)蛋白表达量。结果:未造模大鼠FBG维持在正常水平，体质量随时间逐步增长，视网膜血管走行正常，无荧光素渗漏；造模大鼠FBG维持在较高水平，体质量增长缓慢，且于造模2周开始随着病程延长，体质量逐渐下降，视网膜远端血管发生扭曲，可见毛细血管荧光素渗漏，渗漏面积较大。对照组、模型组和hUC-MSC注射组RGCs密度分别为(2 136.10±215.17)、(849.40±167.82)和(1 549.20±183.26)个/mm 2，总体比较差异有统计学意义( F＝115.218， P<0.01)；模型组和hUC-MSC注射组RGCs密度明显低于对照组，hUC-MSC注射组RGCs密度明显高于模型组，差异均有统计学意义(均 P<0.05)。对照组视网膜结构清晰，层次分明，RGCs形态完整，数目较多；模型组RGCs数量明显减少，出现核固缩，RGC层变薄萎缩；hUC-MSC注射组视网膜结构较完整，RGCs数较模型组多。对照组、模型组和hUC-MSC注射组RGCs凋亡率分别为(2.16±1.11)%、(43.47±2.26)%和(20.75±2.18)%，总体比较差异有统计学意义( F＝445.159， P<0.01)；模型组和hUC-MSC注射组RGCs凋亡率明显高于对照组，hUC-MSC注射组RGCs凋亡率低于模型组，差异均有统计学意义(均 P<0.05)。对照组、模型组和hUC-MSC注射组视网膜组织Bax、Bcl-2和p-p38MAPK蛋白相对表达量总体比较差异均有统计学意义( F＝30.982、12.526、73.158，均 P<0.01)；模型组和hUC-MSC注射组Bax和p-p38MAPK蛋白相对表达量明显高于对照组，Bcl-2蛋白相对表达量明显低于对照组，差异均有统计学意义(均 P<0.05)；hUC-MSC注射组Bax、p-p38MAPK蛋白相对表达量明显低于模型组，Bcl-2蛋白相对表达量明显高于模型组，差异均有统计学意义(均 P<0.05)。各组p38MAPK蛋白相对表达量总体比较，差异无统计学意义( F＝1.182， P＝0.322)。 结论:hUC-MSC玻璃体内注射可抑制DR模型大鼠RGCs凋亡，保护视网膜结构，其可能是通过抑制p38MAPK信号通路发挥抗细胞凋亡作用。

糖尿病视网膜病变;人脐带间充质干细胞;视网膜神经节细胞;凋亡

刘曦;孙晓萍;杨建伟;朱冬梅;王媛

郑州大学附属郑州市中心医院眼科　450000

中华实验眼科杂志

[1]刘曦;孙晓萍;杨建伟;朱冬梅;王媛-.人脐带间充质干细胞对DR大鼠视网膜神经节细胞凋亡的影响及对p38MAPK通路的调控作用)[J].中华实验眼科杂志,2022(01):21-28

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