目的 利用模式生物斑马鱼研究香青兰总黄酮(TFDM)整体发育急性毒性.方法 采用发育至48 h的斑马鱼暴露于 5、10、20、40、42、44、46、48、50、100 μg·mL-1 的 TFDM,分别于暴露后 24、48 h(24、48hpe),计算死亡率、半数死亡浓度(LC50)值;测量每组斑马鱼幼鱼的体长,进行形态学观察并评分;显微镜下观察斑马鱼心脏形态并拍照,记录心率,使用Image-ProPlus5.1测量斑马鱼静脉窦-动脉球(SV-BA)距离;显微镜下观察各组斑马鱼是否有体侧水肿来判断TFDM对肾脏的影响并拍照;应用肝脏标记绿色荧光的转基因斑马鱼Tg(L-FABP:EGFP),通过检测肝脏荧光强度和面积,观察TFDM对肝脏毒性的影响.结果 TFDM的24hpeLC50为50 μg·mL-1,48 hpe LC50为48 μg·mL-1,100μg·mL-1TFDM组斑马鱼幼鱼全部死亡.与空白对照组比较,20 μg·mL-1以下的TFDM对斑马鱼的形态和心、肝、肾各脏器无影响;20 μg·mL-1浓度的TFDM处理斑马鱼48 h导致个别斑马鱼鱼鳔体积减小或缺失,对其他脏器无显著影响;40 μg·mL-1 的TFDM导致斑马鱼出现轻微的心包水肿,处理48 h以后斑马鱼体长显著减小(P＜0.01),形态评分显著下降(P＜0.01),斑马鱼的肝脏形态出现轻微变化,但肝脏荧光强度和肝脏荧光面积无显著性变化,对肾脏无影响;暴露在50 μg·mL-1的TFDM中24 h,斑马鱼出现心包水肿,心率显著下降(P＜0.05),肝脏荧光强度和面积显著减小(P＜0.05),肾脏无明显变化.结论 TFDM对斑马鱼的毒性较小,低浓度(≤10μg·mL-1)的TFDM对斑马鱼无毒性;中浓度(20 μg·mL-1)下TFDM对斑马鱼的毒性微弱,仅导致部分斑马鱼鱼鳔体积减小或缺失,对其他各脏器无毒性;高浓度(≥40μg·mL-1及以上)下有轻微的心脏毒性和肝脏毒性,在临床应用中有必要合理控制用量.

香青兰总黄酮;整体发育急性毒性;斑马鱼;心脏;肾脏;肝脏

冉凯凯;苏文灵;郑瑞芳;夏青;张长青;刘可春;张云;邢建国

新疆医科大学,新疆乌鲁木齐 830011;新疆维吾尔自治区药物研究所,新疆乌鲁木齐 830002;新疆维吾尔药重点实验室,新疆乌鲁木齐 830002;齐鲁工业大学(山东省科学院)山东省科学院生物研究所,山东济南 250103

药物评价研究

[1]冉凯凯;苏文灵;郑瑞芳;夏青;张长青;刘可春;张云;邢建国-.基于斑马鱼的香青兰总黄酮整体发育急性毒性评价研究)[J].药物评价研究,2022(06):1119-1126

整体发育急性毒性,48hpe,ProPlus5,24hpeLC50,hpe,1TFDM

香青兰总黄酮,急性毒性评价,利用模式,模式生物,半数,斑马鱼幼鱼,体长,形态学观察,显微镜下,拍照,Image,静脉窦,SV,BA,转基因斑马鱼,Tg,FABP,EGFP,荧光强度,肝脏毒性,空白对照,脏器,鱼鳔,心包,鱼体,微变,荧光面积,显著性变化,无毒性,微弱,心脏毒性,合理控制

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