目的:探讨甘草总黄酮通过调控丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)/核转录因子κB(NF?κB)信号通路对脂多糖(LPS)诱导的人牙龈成纤维细胞(HGF)炎症反应的抑制作用.方法:体外分离培养原代HGF,以5μg·ml-1 LPS处理后,采用CCK?8实验检测0,1.5,3,6,12,24μg·ml-1甘草总黄酮对HGF细胞活力的影响,筛选出甘草总黄酮适合的剂量和作用时间.体外培养原代HGF,随机分为对照组(不进行任何药物处理)、LPS组(5μg·ml-1)、甘草总黄酮低剂量(6μg·ml-1)+LPS(5μg·ml-1)组、甘草总黄酮高剂量(12μg·ml-1)+LPS(5μg·ml-1)组、甘草总黄酮高剂量(12μg·ml-1)+LPS(5μg·ml-1)+C16?PAF(MAPK激活剂,4μmol·L-1)组.采用CCK?8实验、划痕实验分别检测各组细胞活力和迁移率;酶联免疫吸附(ELISA)试剂盒检测各组细胞炎性因子白细胞介素6(IL?6)、白细胞介素8(IL?8)、环氧合酶?2(COX?2)释放水平;免疫印迹法检测各组细胞IL?6、IL?8、COX?2、细胞间黏附分子?1(ICAM?1)、趋化因子2(CCL2)、基质金属蛋白酶?2(MMP?2)、基质金属蛋白酶?8(MMP?8)及MAPK/NF?κB通路相关蛋白表达.结果:甘草总黄酮可提高LPS诱导的HGF细胞活力,与药物剂量及作用时间呈正相关.与对照组相比,LPS组细胞活力和迁移率显著降低(P<0.05),IL?6、IL?8及COX?2的释放量、IL?6、IL?8、COX?2、ICAM?1、CCL2、MMP?2及MMP?8蛋白表达、p?细胞外调节蛋白激酶1/2(ERK1/2)/ERK1/2、p?c?Jun N?末端激酶(JNK)/JNK、p?p38 MAPK/p38 MAPK、p?NF?κB p65/NF?κB p65及肿瘤坏死因子α(TNF?α)表达显著升高(P<0.05).与LPS组相比,甘草总黄酮低、高剂量+LPS组细胞活力和迁移率均显著升高(P<0.05),IL?6、IL?8及COX?2的释放量、IL?6、IL?8、COX?2、ICAM?1、CCL2、MMP?2及MMP?8蛋白表达、p?ERK1/2/ERK1/2、p?JNK/JNK、p?p38 MAPK/p38 MAPK、p?NF?κB p65/NF?κB p65及TNF?α表达均显著降低(P<0.05),且甘草总黄酮低、高剂量组间差异有统计学意义(P<0.05).与甘草总黄酮高剂量+LPS组相比,甘草总黄酮高剂量+LPS+C16?PAF组细胞活力和迁移率显著降低(P<0.05),IL?6、IL?8及COX?2的释放量、IL?6、IL?8、COX?2、ICAM?1、CCL2、MMP?2及MMP?8蛋白表达、p?ERK1/2/ERK1/2、p?JNK/JNK、p?p38 MAPK/p38 MAPK、p?NF?κB p65/NF?κB p65及TNF?α显著升高(P<0.05).结论:甘草总黄酮可通过抑制MAPK/NF?κB信号通路而降低炎性因子表达,并下调ICAM?1、CCL2、MMP?2、MMP?8蛋白表达,抑制LPS诱导的炎症,促使HGF生长和迁移.

甘草总黄酮;丝裂原活化蛋白激酶/核转录因子κB;脂多糖;人牙龈成纤维细胞;炎症反应

范晶;高一曼;郑圆;郭丹妮;胡金龙;雷小朋

西安医学院第二附属医院口腔科 西安 710038;长治市第二人民医院口腔科

中国药师

[1]范晶;高一曼;郑圆;郭丹妮;胡金龙;雷小朋-.甘草总黄酮通过调控MAPK/NF?κB信号通路对脂多糖诱导的人牙龈成纤维细胞炎症反应的抑制作用)[J].中国药师,2022(12):2101-2107

+C16,+LPS+C16

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