目的 探究藏药十八味党参丸(TEP)的提取物调控脂多糖(LPS)诱导小鼠巨噬细胞RAW 264.7的炎性反应及M1/M2极化分型的探究.方法 Alarmarblue法评价RAW 264.7活力;荧光酶标定量分析细胞活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平;Griess法检测上清液中细胞一氧化氮(NO)的分泌情况;流式细胞术检测表面标志物CD206和CCR7蛋白的表达;RT-qPCR法检测细胞白介素(IL)-1β、IL-6、趋化因子2(CCL2)、一氧化氮合酶(iNOS)、精氨酸酶(ARG)-1和肿瘤坏死因子仅(TNF-α)基因表达的情况;Western blot法检测TEP调控细胞合成iNOS、蛋白激酶B(Akt)和p38丝裂原活化激酶(p38 MAPK)信号通路相关蛋白的表达情况.结果 与模型组相比,TEP组一定程度上提高了RAW 264.7的细胞活性,同时抑制了LPS诱导的细胞内ROS水平的升高.经过LPS刺激后,模型组NO表达量显著升高,在24 h后表达量达到最高,而TEP组NO表达显著降低.模型组的CCR7表达升高,CD206表达下降,TEP干预后CCR7表达下降,CD206表达升高,且趋势呈现浓度依赖.与模型组相比,TEP组的IL-1β、IL-6、CCL2、iNOS、ARG和TNF-α基因表达以及iNOS、Akt和p38MAPK蛋白表达水平均显著降低.结论 TEP能够抑制细胞内ROS水平,降低NO分泌和炎性基因的表达水平,抑制细胞的M1表型,促进M2表型,其机制可能与细胞内iNOS、Akt和p38MAPK信号通路蛋白表达被抑制有关.

藏药十八味党参丸;巨噬细胞;炎性反应;M1/M2极化;Akt/p38MAPK信号通路

浙江医院药剂科,杭州310013;西南交通大学材料科学与工程学院,成都610031

[1]陈紫璐;吴金结;智伟;韩奇-.藏药十八昧党参丸提取物对脂多糖诱导的RAW264.7细胞Akt/p38MAPK信号通路及M1/M2极化影响的探究)[J].中国药学杂志,2022(01):38-43

藏药十八味党参丸,Alarmarblue

脂多糖,RAW264,Akt,p38MAPK,M1,M2,TEP,LPS,小鼠巨噬细胞,炎性反应,细胞活性,reactive,oxygen,species,ROS,Griess,上清液,流式细胞术,表面标志物,CD206,CCR7,qPCR,白介素,趋化因子,CCL2,一氧化氮合酶,iNOS,精氨酸酶,ARG,blot,蛋白激酶,丝裂原,蛋白表达水平,炎性基因,通路蛋白

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