目的 探讨ALKBH5对肝癌细胞迁移、侵袭能力及上皮间质转化(EMT)的影响.方法 选择手术切除的肝癌标本50例,分析ALKBH5与临床病理学参数的关系.设计ALKBH5短发夹核糖核酸(shRNA)序列,构建pLKO.1-TRC vector载体,慢病毒感染肝癌细胞HepG2和SMMC7721,嘌呤霉素筛选并培养稳定低表达ALKBH5细胞株;检测ALKBH5 mRNA及ALKBH5蛋白质水平干扰效率;Transwell实验检测细胞的迁移及侵袭;蛋白质免疫印迹(Western blot)检测细胞EMT相关蛋白的影响.结果 肝癌中ALKBH5蛋白表达与分化程度、临床分期存在相关性(P＜0.05),与血清甲胎蛋白(AFP)水平、肿瘤大小、年龄、性别均无相关性(P＞0.05);下调肝癌细胞ALKBH5表达,对照组和实验组HepG2细胞迁移数目分别为(123±22)、(335±21)个,侵袭数目分别为(118±29)、(282±17)个;对照组和实验组SMMC7721细胞迁移数目分别为(220±27)、(453±23)个,侵袭数目分别为(200±11)、(388±20)个,2组间差异均有统计学意义(P＜0.05).下调ALKBH5表达后,E-钙黏蛋白(E-cadherin)表达水平降低,波形蛋白(Vimentin)、锌指结构转录抑制因子(Snail)表达水平增高.结论 ALKBH5扮演了抑癌基因的角色,下调ALKBH5表达能够促进肝癌细胞的迁移、侵袭及EMT.

肝癌;RNA m6A去甲基酶;ALKBH5;迁移;侵袭;上皮间质转化

孙姚承;汤建军;魏来;杭苏宁;仓杰;王梦涛;奚剑波

江苏大学附属武进医院/徐州医科大学武进临床学院普通外科,江苏常州,213002;江苏大学医学院,江苏镇江,212013

实用临床医药杂志

[1]孙姚承;汤建军;魏来;杭苏宁;仓杰;王梦涛;奚剑波-.ALKBH5对人肝癌细胞上皮间质转化的影响)[J].实用临床医药杂志,2022(15):69-74

ALKBH5,人肝癌细胞,细胞上皮间质转化,癌细胞迁移,侵袭能力,EMT,手术切除,临床病理学,短发夹核糖核酸,shRNA,pLKO,TRC,vector,慢病毒感染,HepG2,SMMC7721,嘌呤霉素,低表达,细胞株,蛋白质水平,Transwell,实验检测,迁移及侵袭,蛋白质免疫印迹,blot,分化程度,临床分期,血清甲胎蛋白,AFP,肿瘤大小,无相,调肝,迁移数,钙黏蛋白,cadherin,平降,波形蛋白,Vimentin,锌指,转录抑制,抑制因子,Snail,抑癌基因,m6A,去甲基酶

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