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典型文献
毛柳苷在脑缺血再灌注后抑制神经元自噬及神经保护作用研究
文献摘要:
目的 通过动物模型和体外细胞培养探索毛柳苷(salidroside,SAL)对脑缺血再灌注损伤的神经保护作用及其可能机制.方法 36只雄性C57BL/6J小鼠随机分为假手术组(12只)、溶剂组(12只)和SAL组(12只).线栓法制作小鼠右侧大脑中动脉闭塞模型,缺血1?h后再灌注,而后即刻尾静脉注射150?μL SAL(剂量10 mg/kg,每只实际用量0.22?mg),溶剂组注射同等体积磷酸盐缓冲液,假手术组不给药.缺血再灌注后24?h进行小鼠神经功能缺损评分,神经元特异核蛋白(neuronal nuclei,NeuN)染色统计脑梗死率.取溶剂组小鼠全脑冰冻切片,自噬标记物微管相关蛋白1轻链3B(microtubule associated protein 1 light chain 3 beta,LC3B)分别与NeuN、胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)免疫荧光共染,观察LC3B与梗死周边区神经元、星形胶质细胞共定位情况,以明确缺血再灌注后24?h产生自噬活动的主要部位.自噬标记物苄氯素1(Beclin-1)、自噬相关蛋白3(autophagy related protein 3,Atg3)分别与NeuN免疫荧光共染,进一步观察梗死周边区神经元自噬水平变化情况,并统计Beclin-1+/NeuN+、Atg3+/NeuN+细胞在单位面积(1?mm2)内的个数.原代大鼠神经元培养10?d后进行氧糖剥夺(oxygen glucose deprivation,OGD),将细胞分为以下6组:对照(control,CON)组、OGD 1?h后复氧1?h(OGD 1?h)组、OGD 1?h后复氧4?h(OGD 4?h)组、SAL组、OGD 1?h后复氧1?h/全程SAL治疗(OGD+SAL 1?h)组、OGD 1?h后复氧4?h/全程SAL治疗(OGD+SAL 4?h)组,CON组和SAL组不进行OGD,SAL剂量50?μmol/L.采用免疫印迹法检测各组细胞中自噬标记物LC3B、Beclin-1、Atg3、Atg5和Atg7的相对表达量;CON组、OGD 4?h组细胞进行LC3B、NeuN免疫荧光共染,观察OGD后神经元内LC3B表达变化情况,并统计LC3B+/NeuN+细胞在单位面积(1?mm2)内的个数.结果 缺血再灌注后24?h,SAL组小鼠神经功能缺损评分(5.8±1.4分vs.?7.1±1.4分,P=0.0332)和脑梗死率(28.7%±9.7%?vs.?39.9%±9.4%,P=0.0038)均低于溶剂组.溶剂组LC3B与梗死周边区神经元有共定位,与星形胶质细胞无共定位.SAL组Beclin-1+/NeuN+(312.4±45.6个/平方毫米vs.471.2±50.3个/平方毫米,P=0.0121)、Atg3+/NeuN+(322.5±26.5个/平方毫米vs.?491.3±42.1个/平方毫米,P=0.0013)细胞数量少于溶剂组.大鼠原代神经元免疫印迹结果显示,OGD 1?h组(1.096±0.004?vs.?1.000±0.000,P=0.0174)、OGD 4?h组(1.213±0.019?vs.?1.000±0.000,P<0.0001)LC3B相对表达量高于CON组;OGD+SAL 4?h组LC3B、Beclin-1、Atg3相对表达量低于OGD 4?h组(0.833±0.029?vs.?1.213±0.019,P<0.0001,0.579±0.081?vs.?1.152±0.144,P<0.0001,0.726±0.182?vs.?1.091±0.177,P=0.0211);OGD+SAL 4?h组LC3B、Beclin-1相对表达量低于OGD+SAL 1?h组(0.833±0.029?vs.?1.046±0.063,P<0.0001;0.579±0.081?vs.?0.921±0.09,P=0.0030).CON组LC3B+/NeuN+细胞数少于OGD 4?h组(51.9±18.7个/平方毫米vs.?584.2±34.5个/平方毫米,P=0.0002).结论 SAL可能通过抑制神经元自噬在急性脑缺血再灌注损伤中发挥神经保护作用.
文献关键词:
脑缺血再灌注;神经元;自噬;毛柳苷;神经保护
作者姓名:
温少红;刘宽;赵顺英;董雯;陈青芳;陈文涛;叶维贞;姜鸣钰;刘向荣
作者机构:
北京 100070 首都医科大学附属北京天坛医院,国家神经系统疾病临床医学研究中心;湖南省人民医院星沙院区神经外科
文献出处:
引用格式:
[1]温少红;刘宽;赵顺英;董雯;陈青芳;陈文涛;叶维贞;姜鸣钰;刘向荣-.毛柳苷在脑缺血再灌注后抑制神经元自噬及神经保护作用研究)[J].中国卒中杂志,2022(09):991-1001
A类:
毛柳苷,Atg3+,OGD+SAL,LC3B+
B类:
神经元自噬,神经保护作用,动物模型,体外细胞,细胞培养,salidroside,脑缺血再灌注损伤,可能机制,C57BL,6J,假手,线栓法,大脑中动脉闭塞模型,即刻,尾静脉注射,磷酸盐缓冲液,神经功能缺损评分,核蛋白,neuronal,nuclei,脑梗死率,全脑,冰冻切片,标记物,微管,轻链,microtubule,associated,protein,light,chain,beta,胶质纤维酸性蛋白,glial,fibrillary,acidic,GFAP,免疫荧光,边区,星形胶质细胞,共定位,Beclin,自噬相关蛋白,autophagy,related,水平变化,1+,NeuN+,单位面积,mm2,氧糖剥夺,oxygen,glucose,deprivation,control,CON,复氧,免疫印迹法,Atg5,Atg7,相对表达量,表达变化,平方毫米,细胞数量,原代神经元,急性脑缺血再灌注
AB值:
0.194771
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