目的:研究洋川芎内酯A(SEA)联合表柔比星(EPI)干预膀胱癌5637细胞的作用机制,探讨SEA对EPI敏感性的影响.方法:采用CCK-8试剂盒检测人输尿管上皮永生化细胞SV-HUC-1和人膀胱癌细胞5637的细胞活力,选用人膀胱癌细胞5637进行后续实验,计算半数抑制浓度(IC50值).将细胞随机分为对照组、SEA低剂量组(SEA10组)、SEA中剂量组(SEA20组)、SEA高剂量组(SEA40组)、EPI单独处理组(EPI组)和联合处理组(SEA40+EPI组).流式细胞仪检测细胞凋亡;CCK-8试剂盒检测细胞光密度(OD)值;免疫蛋白质印迹法(Western blot)检测多药耐药关联蛋白1(MRP1)、肺耐药蛋白(LRP)、拓扑异构酶-Ⅱ(Topo-Ⅱ)蛋白水平.建立裸鼠移植瘤模型,随机分为对照组、SEA药物组、EPI药物组和SEA+EPI组,并采用相应药物灌胃进行干预.检测肿瘤体积;Western blot检测裸鼠移植瘤模型MRP1、增殖细胞核抗原(PCNA)、裂解的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(cleaved caspase-3)蛋白水平.结果:体外实验结果表明,与对照组比较,SEA20组、SEA40组和EPI组细胞凋亡率升高,OD值降低,MRP1、LRP蛋白水平降低,Topo-Ⅱ蛋白水平升高,差异均有统计学意义(P＜0.05);与EPI组比较,SEA40+EPI组细胞凋亡率升高,OD值降低,MRP1、LRP蛋白水平降低,Topo-Ⅱ蛋白水平升高,差异均有统计学意义(P＜0.05).体内实验结果表明,与对照组比较,SEA药物组和EPI药物组裸鼠肿瘤体积缩小,PCNA蛋白水平降低、cleaved caspase-3蛋白水平升高,SEA药物组MRP1水平降低,EPI药物组MRP1水平升高,差异均有统计学意义(P＜0.05);与EPI药物组比较,SEA+EPI组裸鼠肿瘤体积缩小,MRP1、PCNA蛋白水平降低,cleaved caspase-3蛋白水平升高,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论:SEA可通过抑制膀胱癌5637细胞增殖,诱导细胞凋亡,下调MRP1、LRP蛋白表达,上调Topo-Ⅱ蛋白表达,抑制裸鼠移植瘤肿瘤生长,从而增强对EPI的敏感性.

洋川芎内酯A;膀胱癌;表柔比星;耐药性;耐药蛋白;裸鼠移植瘤

林磊;杨树立;孙超群;李宝山

平顶山市第一人民医院泌尿外科,河南平顶山467000;河南大学第一附属医院泌尿外科,河南开封475000

山东中医药大学学报

[1]林磊;杨树立;孙超群;李宝山-.洋川芎内酯A联合表柔比星干预膀胱癌5637细胞的作用机制研究)[J].山东中医药大学学报,2022(05):618-625

SEA10,SEA20,SEA40,SEA40+EPI,SEA+EPI

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