典型文献
circ_0000285对过氧化氢诱导的心肌细胞氧化损伤的影响和机制研究
文献摘要:
目的 探讨circ_0000285对过氧化氢(H2O2)诱导的心肌细胞氧化损伤的影响及其可能作用机制.方法 H2O2诱导大鼠心肌细胞H9C2建立细胞氧化损伤模型,si-NC、si-circ_0000285、si-circ_0000285与anti-miR-NC、si-circ_0000285与anti-miR-625分别转染至H9C2细胞后加入200μmol/L H2O2处理;用实时定量聚合酶链反应(quantitative real time polymerase chain reaction,qRT-PCR)法检测circ_0000285、miR-625的表达量;用试剂盒检测丙二醛(malondialedhyde,MDA)、一氧化氮(nitric oxide,NO)的浓度与超氧化物歧化酶(superoxide dis-mutase,SOD)的活性;用MTT实验检测细胞增殖能力;用流式细胞术检测细胞凋亡率;双荧光素酶报告实验检测circ_0000285与miR-625的靶向关系;Western blot法检测活化半胱氨酸蛋白酶3(cleaved cysteinyl aspartate-specific protease-3,cleaved caspase-3)、微管相关蛋白轻链3II(microtubule-associated protein l light chain 3Ⅱ,LC3-Ⅱ)、微管相关蛋白轻链3Ⅰ(microtubule-associated protein l light chain 3Ⅰ,LC3-Ⅰ)蛋白表达量并计算LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值.结果 H2O2诱导的H9C2细胞中circ_0000285的表达量升高(1.00±0.04 vs.2.24±0.12),而miR-625的表达量降低(1.00±0.05 vs.0.37±0.05);转染si-circ_0000285可降低H2O2诱导的H9C2细胞中MDA[(44.59±2.74)μmol/L vs.(25.87±2.83)μmol/L]、NO[(88.91±4.15)μmol/L vs.(50.01±4.42)μmol/L]的浓度和LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值(1.67±0.26 vs.1.07±0.12)(P<0.05),并可降低细胞凋亡率(28.26%±4.20%vs.15.42%±0.80%)和cleaved caspase-3蛋白浓度(P<0.05),而细胞存活率(47.62%±5.48%vs.90.21%±3.67%)、SOD的活性[(11.32±1.39)U/mL vs.(37.44±2.43)U/mL]升高(P<0.05);circ_0000285可靶向调控miR-625的表达;共转染si-circ_0000285与anti-miR-625后H2O2诱导的H9C2细胞中MDA[(25.78±2.33)μmol/L vs.(36.83±2.29)μmol/L]、NO[(50.46±3.15)μmol/L vs.(70.72±2.12)μmol/L]的浓度和LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值(1.07±0.11 vs.1.49±0.27)升高(P<0.05),细胞凋亡率(15.35%±0.52%vs.19.76%±0.74%)和cleaved caspase-3蛋白浓度升高(P<0.05),而细胞存活率(90.24%±4.01%vs.57.12%±4.07%)和SOD的活性[(37.93±2.59)U/mL vs.(22.45±1.88)U/mL]降低(P<0.05).结论 干扰circ_0000285表达可通过上调miR-625的表达而促进心肌细胞增殖并可抑制细胞氧化应激反应、凋亡及自噬从而减轻H2O2诱导的心肌细胞氧化损伤.
文献关键词:
circ_0000285;微小RNA-625;大鼠心肌细胞H9C2;过氧化氢;心肌细胞损伤
中图分类号:
作者姓名:
杨少君;周乃珍;王晓霞
作者机构:
厦门大学附属中山医院心内科,福建厦门361004;厦门大学附属中山医院保健病房,福建厦门361004
文献出处:
引用格式:
[1]杨少君;周乃珍;王晓霞-.circ_0000285对过氧化氢诱导的心肌细胞氧化损伤的影响和机制研究)[J].岭南心血管病杂志,2022(06):568-574
A类:
malondialedhyde,3II
B类:
circ,细胞氧化损伤,H2O2,大鼠心肌细胞,H9C2,损伤模型,si,NC,miR,实时定量聚合酶链反应,quantitative,real,polymerase,chain,reaction,qRT,试剂盒,一氧化氮,nitric,superoxide,dis,mutase,MTT,实验检测,细胞增殖能力,流式细胞术,细胞凋亡率,双荧光素酶报告实验,blot,半胱氨酸蛋白酶,cleaved,cysteinyl,aspartate,specific,protease,caspase,微管,轻链,microtubule,associated,protein,light,LC3,蛋白浓度,细胞存活率,靶向调控,共转染,心肌细胞增殖,可抑制,氧化应激反应,自噬,心肌细胞损伤
AB值:
0.214646
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