目的:探究黄芪多糖(APS)通过调控高迁移率族蛋白1/Toll样受体4/核转录因子-κB(HMGB1/TLR4/NF-κB)信号通路对大鼠缺氧/复氧(H/R)诱导的心肌细胞自噬及凋亡的抑制作用.方法:建立H9C2心肌细胞H/R损伤模型并分为4组:对照组、H/R组、APS组和HMGB1抑制剂组.CCK-8法和EdU染色法检测细胞增殖能力;酶联免疫吸附试验检测细胞肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-1β、IL-6含量;透射电镜观察细胞自噬小体的形成;膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素/碘化丙啶(AnnexinV-FITC/PI)双染法检测细胞凋亡;实时定量PCR检测细胞HMGB1、TLR4、NF-κB p65 mRNA表达水平;蛋白免疫印迹法检测细胞HMGB1、TLR4、NF-κB p65、B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-3(caspase-3)、P62、微管相关蛋白1A/1B-轻链3(MAP1LC3,缩写为LC3)-Ⅱ蛋白表达水平.结果:与对照组相比,H/R组细胞增殖能力明显减弱,凋亡及自噬水平明显增加,细胞内可见大量自噬小体形成,HMGB1、TLR4、NF-κB mRNA和蛋白表达水平,TNF-α、IL-1β、IL-6含量,Bax、caspase-3、LC3-Ⅱ蛋白表达水平均明显升高,Bcl-2、P62表达水平均明显降低,差异均有统计学意义(P均<0.05);与H/R组相比,APS组、HMGB1抑制剂组细胞增殖能力均明显增加,凋亡及自噬能力均明显降低,细胞内自噬小体数量减少,HMGB1、TLR4、NF-κB p65 mRNA和蛋白表达水平,TNF-α、IL-1β、IL-6含量,Bax、caspase-3、LC3-Ⅱ蛋白表达水平均明显降低,Bcl-2、P62蛋白表达水平均明显升高,差异均有统计学意义(P<0.05).结论:APS能够修复H9C2心肌细胞的H/R损伤,可能通过抑制HMGB1/TLR4/NF-κB信号通路,抑制细胞凋亡和自噬活性.

高迁移率族蛋白1/Toll样受体4/核转录因子-κB;黄芪多糖;缺氧/复氧;心肌细胞;自噬;凋亡

王忠庆;蔡帆;诸波;陈功;魏刚

646000 四川省,南充市中心医院 心血管内科;646000 四川省,南充市中心医院 儿科;西南医科大学附属医院 心血管内科

中国循环杂志

[1]王忠庆;蔡帆;诸波;陈功;魏刚-.黄芪多糖对大鼠缺氧/复氧诱导的心肌细胞自噬及凋亡抑制作用的机制探讨)[J].中国循环杂志,2022(02):185-192

MAP1LC3

黄芪多糖,复氧,氧诱导,心肌细胞自噬,机制探讨,APS,高迁移率族蛋白,Toll,样受体,核转录因子,HMGB1,TLR4,H9C2,损伤模型,CCK,EdU,染色法,细胞增殖能力,酶联免疫吸附试验,试验检测,透射电镜,电镜观察,自噬小体,膜联蛋白,异硫氰酸荧光素,碘化丙啶,AnnexinV,FITC,实时定量,p65,蛋白免疫印迹法,细胞淋巴瘤,Bcl,Bax,含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶,caspase,P62,微管,1A,1B,轻链,缩写,蛋白表达水平,凋亡和自噬

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