目的:从分子水平探究颗粒酶B(GRB)-穿孔素(PFP)对选择性诱导胰腺炎时巨噬细胞凋亡的影响.方法:采用肿瘤坏死因子α(TNF-α)刺激人单核巨噬细胞系(TPH-1)模拟急性胰腺炎时巨噬细胞炎症反应,通过CCK8法筛选TNF-α、PFP、GRB的最适浓度;流式细胞仪分别检测对照组、TNF-α组、PFP+GRB组、TNF-α+PFP+GRB组的细胞凋亡情况.将细胞样本分为3组:正常细胞组(NC组)、TNF-α处理组(Treat1组)和TNF-α+PFP+GRB处理组(Treat2组).提取3组细胞RNA进行转录组学分析,分别通过主成分分析、差异基因分析、富集分析检测各组基因表达情况;选取"细胞因子-细胞因子受体相互作用通路"中的7个差异表达基因(RAB37、GPA33、USH1C、SYTL1、MSRB3、GPER1和CD1B)应用荧光定量PCR验证转录组学分析的准确性.结果:Treat2组与Treat1及NC组相比,细胞凋亡比例显著升高(P<0.05);NC组与Treat1组、Treat2组的差异比较大,显著差异基因较多,而Treat1组与Treat2组的显著差异基因较少,但Treat2组比Treat1组相对于NC组的变化更大;富集分析显示差异基因主要富集于"细胞因子-细胞因子受体相互作用通路";荧光定量PCR结果显示,所选取的7个差异基因与NC组相比明显下调(P<0.05),和转录组学结果趋势一致.结论:GRB-PFP可选择性诱导胰腺炎时巨噬细胞的凋亡,并作用于"细胞因子-细胞因子受体相互作用通路",从而下调细胞因子表达,减轻炎症反应.

胰腺炎;细胞凋亡;细胞因子;巨噬细胞;颗粒酶B;穿孔素

孔鸿儒;俞浩辉;陈格尔;陈咨苗;戴胜杰;孙学成;金约朋;杨文军;孙洪伟

温州医科大学附属第一医院 肝胆胰外科,浙江 温州 325015;温州医科大学 第一临床医学院(信息与工程学院),浙江 温州 325035;温州医科大学附属第一医院 内分泌科,浙江 温州 325015;温州医科大学附属第一医院 消化内科,浙江 温州 325015

温州医科大学学报

[1]孔鸿儒;俞浩辉;陈格尔;陈咨苗;戴胜杰;孙学成;金约朋;杨文军;孙洪伟-.基于KEGG通路富集分析颗粒酶B-穿孔素选择性诱导胰腺炎时巨噬细胞凋亡的作用)[J].温州医科大学学报,2022(12):972-980

PFP+GRB,+PFP+GRB,Treat1,Treat2,RAB37,GPA33,USH1C,SYTL1

通路富集分析,颗粒酶,穿孔素,性诱,巨噬细胞凋亡,分子水平,单核巨噬细胞,巨噬细胞系,TPH,急性胰腺炎,细胞炎症,CCK8,最适浓度,流式细胞仪,细胞样本,NC,转录组学分析,差异基因分析,分析检测,细胞因子受体,作用通路,差异表达基因,MSRB3,GPER1,CD1B,差异比较,可选择性,调细

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