目的:探讨清肾颗粒含药血清是否能通过抑制氧化应激介导的NF-κB信号通路的活化,从而减轻高糖诱导的HK-2细胞转分化.方法:使用高效液相色谱法分析清肾颗粒中的活性成分.选用同代HK-2细胞随机分为7组,包括空白对照组,渗透压对照组,高糖组,低、中、高剂量清肾颗粒组,以及吡咯烷二硫氨基甲酸(PDTC)组.采用倒置相差显微镜观察细胞形态学改变;MTT法测定各组细胞活性;流式细胞术检测HK-2细胞中活性氧(ROS)含量,ELISA法检测丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性;电泳迁移率变动分析(EMSA)检测HK-2细胞中NF-κB p65的DNA结合活性变化;Western blot法检测HK-2细胞中NF-κB p65、p-IκBα、IKKα、MCP-1和ICAM-1的蛋白水平;免疫荧光法检测HK-2细胞中NF-κB p65和α-SMA的蛋白表达情况.结果:通过高效液相色谱法初步明确清肾颗粒中含有绿原酸、盐酸小檗碱、大车前苷、滨蒿内酯、6,7-二甲氧基香豆素、表小檗碱、黄连碱、丹酚酸B、巴马汀、益母草碱、大黄酸和丹参酮IIA.高糖诱导的HK-2细胞与空白对照组比较ROS和MDA水平显著升高(P<0.05),SOD活性显著降低(P<0.05),NF-κB p65、p-IκBα、IKKα、MCP-1、ICAM-1和α-SMA蛋白水平显著升高(P<0.05).清肾颗粒含药血清干预后高糖诱导的HK-2细胞中ROS和MDA水平显著下降(P<0.05),SOD活性显著升高(P<0.05),NF-κB p65、p-IκBα、IKKα、MCP-1、ICAM-1和α-SMA蛋白水平显著降低(P<0.05).结论:清肾颗粒含药血清能通过抑制氧化应激介导的NF-κB信号通道的活化,减轻高糖诱导的肾小管上皮细胞转分化.

清肾颗粒;NF-κB信号通路;HK-2细胞;上皮-间充质转化;氧化应激

张磊;金华;王东;程梦;李卓娅;王亿平

安徽中医药大学第一附属医院肾内科,安徽合肥230031;繁昌县中医院肾内科,安徽芜湖241200

中国病理生理杂志

[1]张磊;金华;王东;程梦;李卓娅;王亿平-.清肾颗粒含药血清通过抑制氧化应激介导的NF-κB信号通路减轻高糖诱导的肾小管上皮细胞转分化)[J].中国病理生理杂志,2022(07):1234-1245

清肾颗粒

含药血清,清通,抑制氧化,高糖诱导,肾小管上皮细胞转分化,HK,高效液相色谱法,活性成分,空白对照,渗透压,高剂量,粒组,吡咯烷,PDTC,倒置,相差显微镜,细胞形态学,MTT,细胞活性,流式细胞术,ROS,电泳迁移,迁移率,EMSA,p65,结合活性,活性变化,blot,IKK,MCP,ICAM,免疫荧光法,SMA,绿原酸,盐酸小檗碱,大车前苷,滨蒿内酯,甲氧基,香豆素,表小檗碱,黄连碱,丹酚酸,巴马汀,益母草碱,大黄酸,丹参酮,IIA

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