目的:探讨发酵红参总皂苷(FRGTS)对高糖诱导下肾小管上皮细胞发生上皮细胞-间充质转化(EMT)的抑制作用,并阐明其作用机制.方法:将大鼠肾小管上皮NRK-52E细胞分为正常对照组(5.5 mmol·L-1 D-葡萄糖)、高糖组(30.0 mmol·L-1 D-葡萄糖)、沉默信息调节因子1(SIRT1)抑制剂EX527组(30.0 mmol·L-1 D-葡萄糖+10.0μmol·L-1.EX527)、FRGTS组(30.0 mmol·L-1 D-葡萄糖+25 mg·L-1FRGTS)和EX527+FRGTS组(30.0 mmol·L-1 D-葡萄糖+10μmol·L-1 EX527+25 mg·L-1FRGTS).采用免疫荧光法检测各组细胞中E-钙黏蛋白(E-cadherin)和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)蛋白表达水平,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测各组细胞中E-cadherin、α-SMA和SIRT1 mRNA表达水平,ELISA法检测培养上清液中Ⅰ型胶原(ColⅠ)水平,Western blotting法检测各组细胞中SIRT1、转化生长因子β1(TGF-β1)和Smad3蛋白表达水平.结果:高糖培养48 h后,与正常对照组比较,高糖组NRK-52E细胞中E-cadherin蛋白表达水平和mRNA表达水平降低(P<0.01),α-SMA蛋白表达水平和mRNA表达水平升高(P<0.01),NRK-52E细胞上清液中ColⅠ水平升高(P<0.01),SIRT1 mRNA和蛋白表达水平均明显降低(P<0.01),TGF-β1和Smad3蛋白表达水平升高(P<0.01);与高糖组比较,FRGTS组NRK-52E细胞中E-cadherin mRNA表达水平升高(P<0.01),α-SMA mRNA表达水平降低(P<0.05),NRK-52E细胞上清液中ColⅠ水平降低(P<0.05),SIRT1 mRNA和蛋白表达水平均升高(P<0.05或P<0.01),TGF-β1和Smad3蛋白表达水平降低(P<0.05或P<0.01);与FRGTS组比较,EX527+FRGTS组NRK-52E细胞中E-cadherin mRNA表达水平明显降低(P<0.01),α-SMA mRNA表达水平明显升高(P<0.05),NRK-52E细胞上清液中ColⅠ水平升高(P<0.05),SIRT1 mRNA和蛋白表达水平明显降低(P<0.01),TGF-β1和Smad3蛋白表达水平明显升高(P<0.01).结论:FRGTS可通过上调SIRT1表达,进而抑制TGF-β1/Smad信号通路,有效抑制肾小管上皮细胞发生EMT.

发酵红参总皂苷;上皮细胞-间充质转化;沉默信息调节因子1;转化生长因子β1;Smad;肾小管上皮细胞

曲萌;郑鸿;李焱;陈博学;姜雨竹;王胜告;于春艳;董志恒

北华大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室,吉林 吉林 132013;北华大学基础医学院病理学教研室,吉林 吉林 132013;北华大学基础医学院解剖学教研室,吉林 吉林 132013

吉林大学学报（医学版）

[1]曲萌;郑鸿;李焱;陈博学;姜雨竹;王胜告;于春艳;董志恒-.发酵红参总皂苷对高糖诱导大鼠肾小管上皮细胞间充质转化的抑制作用及其机制)[J].吉林大学学报（医学版）,2022(05):1182-1189

发酵红参总皂苷,FRGTS,1FRGTS,EX527+FRGTS,EX527+25

高糖诱导,大鼠肾小管上皮细胞,上皮细胞间充质转化,EMT,NRK,52E,正常对照,沉默信息调节因子,SIRT1,+10,免疫荧光法,钙黏蛋白,cadherin,平滑肌肌动蛋白,SMA,蛋白表达水平,qPCR,养上,上清液,Col,blotting,转化生长因子,TGF,Smad3,平降

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