典型文献
高通量筛选NMNAT1抑制剂及其肿瘤杀伤作用
文献摘要：
目的 利用在大肠杆菌体系中诱导表达的人源NMNAT1蛋白筛选其抑制剂,寻找治疗肿瘤的新药物.方法 利用酶切连接体系将人源NMNAT1插入pET21b(+)载体,将重组质粒转化入大肠杆菌BL21(DE3)菌株过表达蛋白,对重组蛋白进行纯化,通过3段式酶联荧光法在2280种天然化合物中筛选具有抑制NMNAT1活性的化合物,并在细胞水平验证其对肿瘤细胞的杀伤效果.结果 纯化得到较高纯度和活性的人重组NMNAT1蛋白;筛选出6种高效的NMNAT1抑制剂;其中一种抑制剂fraxetin能降低乳腺癌细胞NAD+含量,促进细胞凋亡,与敲低NMNAT1后转录组测序(RNA-seq)分析得出的细胞凋亡通路增强一致.结论 Fraxetin是NMNAT1强效抑制剂,能够促进乳腺癌细胞凋亡.
文献关键词：
烟酰胺单核苷酸腺苷转移酶1(NMNAT1);蛋白纯化;高通量药物筛选;凋亡
中图分类号：
作者姓名：
沙务嘎;李隽
作者机构：
中国医学科学院基础医学研究所 北京协和医学院基础学院 生物化学与分子生物学系,北京100005
文献出处：
引用格式：
[1]沙务嘎;李隽-.高通量筛选NMNAT1抑制剂及其肿瘤杀伤作用)[J].基础医学与临床,2022(06):933-939
A类：
NMNAT1,pET21b,fraxetin,Fraxetin
B类：
高通量筛选,杀伤作用,大肠杆菌,菌体,诱导表达,新药,连接体,重组质粒,化入,BL21,DE3,过表达,重组蛋白,段式,荧光法,种天然,天然化合物,肿瘤细胞,高纯度,乳腺癌细胞,NAD+,敲低,转录组测序,seq,凋亡通路,强效,烟酰胺单核苷酸,腺苷,转移酶,蛋白纯化,高通量药物筛选
AB值：
0.296634
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