典型文献
基于CRISPR/Cas9系统高效编辑小鼠miR let-7a
文献摘要：
目的 构建靶向小鼠miR let-7a的高效CRISPR/Cas9系统.方法 根据小鼠miR let-7a的两个编码位点let-7a-1和let-7a-2的编码序列各设计了两对dual-sgRNAs导向序列,通过sgRNA表达载体的构建、小鼠N2a细胞的共转染、药物筛选、阳性细胞PCR产物测序以及TA克隆测序分析等实验步骤完成了4对dual-sgRNAs导向序列的打靶效力分析.结果 所构建的4对打靶载体在细胞中发挥了作用,打靶位点均出现了碱基插入或缺失,药物筛选阳性细胞打靶位点RCR产物Sanger法测序峰图在4个靶点位置均有套峰出现.TA克隆测序结果表明本研究设计的4对dual-sgRNAs导向序列的打靶效率分别为42.10％、62.50％、52.63％和47.37％.结论 本研究所设计的4对dual-sgRNAs导向序列均可以有效介导Cas9蛋白切割小鼠miR let-7a,形成突变效应.为后续miR let-7a作用靶点的深入挖掘,阐明其发挥抑癌功能的作用机制提供了依据.
文献关键词：
miRs;let-7a;CRISPR/Cas9;基因编辑;肿瘤发生
中图分类号：
作者姓名：
周岚;张生贵;胡祖梁;王添贤;岳鹏鹏;于鸿浩
作者机构：
桂林医学院 生物技术学院 细胞与遗传学教研室,广西 桂林541104;桂林医学院第二附属医院 放射科,广西 桂林541199
文献出处：
引用格式：
[1]周岚;张生贵;胡祖梁;王添贤;岳鹏鹏;于鸿浩-.基于CRISPR/Cas9系统高效编辑小鼠miR let-7a)[J].基础医学与临床,2022(06):857-863
A类：
B类：
CRISPR,Cas9,let,7a,码位,编码序列,两对,dual,sgRNAs,表达载体,N2a,共转染,药物筛选,阳性细胞,TA,克隆测序,测序分析,实验步骤,打靶,效力分析,靶位,碱基,RCR,Sanger,突变效应,作用靶点,miRs,基因编辑,肿瘤发生
AB值：
0.323584
相似文献
机标中图分类号，由域田数据科技根据网络公开资料自动分析生成，仅供学习研究参考。
