典型文献
髓系特异性Abro1基因敲除小鼠构建和表型初步分析
文献摘要：
目的:构建髓系特异性Abro1(Abraxas brother 1)基因敲除小鼠,并初步分析其对小鼠造血系统及LPS诱导败血症的影响.方法:采用CRISPR/Cas9基因编辑技术和Cre/LoxP重组系统构建Abro1flox/+小鼠,将Abro1flox/+雌雄小鼠自交,子代得到Abro1flox/flox基因型小鼠.Abro1flox/flox与Lyz2-Cre+小鼠交配,子代得到Abro1flox/+/Lyz2-Cre+小鼠,再将其与Abro1flox/flox交配,最终得到的Abro1flox/flox/Lyz2-Cre+小鼠为髓系特异性Abro1基因敲除小鼠,即MKO小鼠;Abro1flox/flox/Lyz2-Cre?小鼠作为野生型小鼠,即WT小鼠.提取WT和MKO小鼠尾基因组DNA,PCR扩增后琼脂糖凝胶电泳鉴定其基因型.提取WT和MKO小鼠免疫细胞蛋白,Western blot检测ABRO1蛋白表达.流式细胞术分析小鼠骨髓和外周血免疫细胞组成,检测MKO小鼠对造血系统的影响.LPS处理WT和MKO小鼠3 h,检测血清中相关生化指标变化以及炎症因子分泌情况.结果:PCR和Western blot结果显示髓系特异性Abro1基因敲除小鼠构建成功.流式细胞术结果显示WT和MKO小鼠骨髓和外周血中髓系细胞(CD11b+、CD11b+Ly6G+、CD11b+Ly6C+)和淋巴细胞组成(CD3+、B220+)无差异.LPS诱导败血症实验中,MKO小鼠相关生化指标和炎症因子水平均低于WT小鼠,表明MKO小鼠可抵抗LPS诱导的败血症.结论:成功构建ABRO1 MKO敲除小鼠,发现MKO小鼠造血系统正常,但可抵抗LPS诱导的败血症,ABRO1 MKO小鼠的建立为揭示ABRO1在免疫细胞亚群中的差异性调控机制提供了良好的动物模型.
文献关键词：
ABRO1;Cre/LoxP重组系统;髓系特异性基因敲除小鼠;造血分化;败血症
中图分类号：
作者姓名：
李亚婷;张洁;尹荣华;杨晓明;任广明;葛志强
作者机构：
天津大学化工学院制药工程系,天津300072;中国人民解放军军事科学院军事医学研究院生命组学研究所,北京102206
文献出处：
引用格式：
[1]李亚婷;张洁;尹荣华;杨晓明;任广明;葛志强-.髓系特异性Abro1基因敲除小鼠构建和表型初步分析)[J].中国免疫学杂志,2022(05):580-585
A类：
Abro1,Abraxas,Abro1flox,MKO,ABRO1,CD11b+Ly6G+,CD11b+Ly6C+,B220+,髓系特异性基因敲除小鼠,造血分化
B类：
初步分析,brother,造血系统,LPS,败血症,CRISPR,Cas9,基因编辑技术,LoxP,系统构建,雌雄,自交,子代,基因型,Lyz2,Cre+,交配,野生型,WT,鼠尾,琼脂糖凝胶电泳,电泳鉴定,blot,流式细胞术,外周血免疫细胞,细胞组成,指标变化,髓系细胞,CD3+,炎症因子水平,立为,免疫细胞亚群,调控机制,动物模型
AB值：
0.137243
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