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实时荧光重组酶聚合酶扩增技术(RPA)快速检测鼠疫耶尔森菌
文献摘要：
目的 建立基于实时荧光重组酶聚合酶扩增(RPA)的鼠疫耶尔森菌快速检测技术.方法 以鼠疫菌特异基因序列YPS723为靶标,设计实时荧光RPA引物探针并进行筛选;构建含有基因待检片段的重组质粒进行实时荧光RPA方法灵敏度的评价;将15种非鼠疫菌细菌基因组混合后进行实时荧光RPA方法特异性验证;将鼠疫菌基因组掺入人血清和小鼠全血中模拟自然感染状态,以评估实时荧光RPA检测的实用性.结果 筛选出的实时荧光RPA引物、探针在39℃条件下15 min内即可在便携装置上获得检测结果,最低检测模板质粒浓度为10拷贝/μl,与其他细菌无交叉反应且重复性良好.实时荧光RPA对人血清模拟样本和小鼠全血模拟样本中鼠疫菌基因组的检出限为50 fg/μl,且在模拟样本盲测中正确率达100％.结论 该研究开发了一种快速、便携、灵敏度高、特异性好的实时荧光RPA方法用于鼠疫菌的检测.
文献关键词：
鼠疫耶尔森菌;实时荧光RPA;YPS723;检测
中图分类号：
作者姓名：
白欣茹;袁媛;徐健皓;辛文文;康琳;王菁;李岩伟;高姗;赵宝华;王景林
作者机构：
军事科学院军事医学研究院微生物流行病研究所,病原微生物生物安全国家重点实验室,北京 100071;福建农林大学生命科学学院,福州 350000;河北师范大学生命科学学院,石家庄 050024
文献出处：
引用格式：
[1]白欣茹;袁媛;徐健皓;辛文文;康琳;王菁;李岩伟;高姗;赵宝华;王景林-.实时荧光重组酶聚合酶扩增技术(RPA)快速检测鼠疫耶尔森菌)[J].军事医学,2022(07):487-492
A类：
YPS723,模拟自然感染
B类：
重组酶聚合酶扩增技术,RPA,鼠疫耶尔森菌,快速检测技术,鼠疫菌,异基因,基因序列,靶标,引物,物探,重组质粒,细菌基因组,法特,掺入,人血清,全血,感染状态,拷贝,交叉反应,模拟样本,检出限,fg,中正,研究开发,灵敏度高
AB值：
0.209413
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