典型文献
登革病毒、黄热病毒和基孔肯雅病毒三重实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立及评价
文献摘要：
目的:建立登革病毒(dengue virus, DENV)、黄热病毒(yellow fever virus, YFV)和基孔肯雅病毒(chikungunya virus, CHIKV)核酸的三重实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reaction, RT-PCR)检测方法。方法:通过全球共享数据库下载DENV(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ型)、YFV、CHIKV全基因组序列进行比对分析，针对这3种病毒的相对保守区域分别设计特异性引物和探针，建立三重实时荧光定量RT-PCR检测方法，以其他病毒核酸评价方法的特异性，用病毒体外转录RNA评价方法的灵敏度，以病毒高、中、低浓度核酸进行独立重复实验评价方法的重复性。DENV采用登革热患者血清进行验证，YFV、CHIKV采用模拟阳性标本进行验证，采用健康人血清进行阴性验证。结果:本方法与其他病毒核酸无交叉反应；对DENV(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ型)、YFV、CHIKV的最低检出限分别为21.55拷贝/反应、21.25拷贝/反应、21.85拷贝/反应、22.75拷贝/反应、22拷贝/反应、45.65拷贝/反应；各浓度检测
Ct值的标准差在0.5以内、变异系数在3%以下；临床阳性标本及模拟阳性标本的检出率为100%，健康人血清的阴性率为100%。
结论:本研究建立的DENV、YFV和CHIKV的三重实时荧光定量RT-PCR检测方法具有良好的特异性、灵敏度和重复性。
文献关键词：
逆转录-聚合酶链反应;登革病毒;黄热病毒;基孔肯雅病毒
中图分类号：
作者姓名：
阚乃鹏;翁育伟;俞婷婷;王金章
作者机构：
福建省疾病预防控制中心，福州 350012;福建师范大学生命科学学院，福州 350108
文献出处：
引用格式：
[1]阚乃鹏;翁育伟;俞婷婷;王金章-.登革病毒、黄热病毒和基孔肯雅病毒三重实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立及评价)[J].中华实验和临床病毒学杂志,2022(06):707-711
A类：
B类：
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AB值：
0.282614
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