典型文献
TALENs介导MSTN基因突变山羊的制备及性能分析
文献摘要：
肌肉生长抑制素(myostatin,MSTN)是一种骨骼肌生长发育的负调控因子,可以抑制成肌细胞的增殖,是动物品种改良的重要候选基因,该基因突变能够引起骨骼肌的广泛性增生与肥大,产生"双肌"症状,导致动物脂肪分化减少、肌肉含量增加,从而满足市场动物肉品质消费的需求.为了获得"双肌"表型的MSTN基因突变克隆山羊,本研究在山羊MSTN基因第一外显子序列设计并构建TALENs表达载体,转染山羊胎儿成纤维细胞,经嘌呤霉素筛选获得抗性细胞株,通过PCR检测和基因测序筛选MSTN基因突变细胞株作为供核细胞进行山羊体细胞核移植,并鉴定MSTN基因突变类型;通过组织切片分析MSTN基因突变山羊肌肉组织形态结构,监测不同月龄克隆山羊体重并分析其不同生长发育阶段的体重增长趋势.结果表明,共获得109株MSTN基因突变细胞株,突变效率达到79.0％(109/138),其中46株为双等位基因突变,占细胞株总数的33.3％(46/138).选取4株生长状态较好的MSTN基因突变细胞株(1株为双等位基因纯合突变,3株为非纯合突变)进行体细胞核移植至12只受体山羊,30 d时B超检查出受孕母羊4只,受孕率为33.3％(4/12),妊娠到期分娩2只克隆山羊,测序结果表明M-1克隆山羊MSTN双等位基因中的一个等位基因未产生突变,另一个等位基因缺失3 bp;M-2克隆山羊MSTN双等位基因中的一个等位基因产生1 bp碱基插入,另一个等位基因缺失13 bp,两种突变均造成MSTN在突变位点之后的蛋白序列丢失.此外,M-1克隆山羊肌纤维排列紧密且粗大,每月体重均高于普通野生型山羊,但与普通野生型山羊生长趋势一致,且能够健康发育至成年.本研究利用TALENs技术成功介导山羊MSTN基因定点修饰,并获得MSTN基因突变的山羊胎儿成纤维细胞,将其作为供核细胞成功生产MSTN基因突变克隆山羊,为培育"双肌"表型山羊新品系奠定了技术基础,也为将来其他转基因动物的制备提供了参考方法.
文献关键词：
肌肉生长抑制素;基因突变;山羊;TALENs;体细胞核移植
中图分类号：
作者姓名：
宋绍征;何正义;成勇;于宝利;张婷;李丹
作者机构：
无锡太湖学院健康与护理学院,基础医学系,无锡 214064;赣南医学院第一附属医院临床医学研究中心,赣州 341000;扬州大学兽医学院,江苏省转基因动物制药工程研究中心,扬州 225009
文献出处：
引用格式：
[1]宋绍征;何正义;成勇;于宝利;张婷;李丹-.TALENs介导MSTN基因突变山羊的制备及性能分析)[J].遗传,2022(06):531-542
A类：
B类：
TALENs,MSTN,山羊,制备及性能,肌肉生长抑制素,myostatin,骨骼肌,负调控,调控因子,成肌细胞,细胞的增殖,品种改良,重要候选基因,广泛性,肥大,动物脂肪,脂肪分化,肌肉含量,肉品质,外显子,子序列,序列设计,表达载体,转染,胎儿,成纤维细胞,嘌呤霉素,获得抗性,细胞株,基因测序,变细,核细胞,体细胞核移植,基因突变类型,组织切片,切片分析,肌肉组织,组织形态,形态结构,不同月龄,发育阶段,体重增长,共获,变效,双等,等位基因突变,生长状态,纯合突变,查出,孕母,母羊,受孕率,到期,分娩,基因缺失,bp,碱基,突变位点,肌纤维,粗大,每月,野生型,生长趋势,健康发育,研究利用,定点修饰,新品系,技术基础,转基因,参考方法
AB值：
0.310695
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