目的 探讨miR-202-5p对前蛋白转化酶枯草溶菌素9(PCSK9)的调控作用,及对阿尔茨海默症(AD)神经元损伤的影响.方法 SD大鼠用侧脑室注射β-淀粉样蛋白(Aβ1-42)法建立AD模型,随机分正常对照组、模型组、ago-miR-202-5p组、ago-NC组、PCSK9抑制剂组.给药结束后进行空间记忆及学习能力检测;尼氏染色检测脑皮层组织神经元变化;神经元核抗原(NeuN)免疫荧光染色法检测脑皮层组织神经元数目;ELISA法检测脑脊液中PCSK9、β-淀粉样蛋白42(Aβ42)、β-淀粉样蛋白40(Aβ40)、总胆固醇(TC)及脑皮层组织中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、磷酸化Tau蛋白(P-tau)水平;qRT-PCR法检测脑皮层组织miR-202-5p表达水平;Western blot法检测脑皮层组织PCSK9、LDL受体相关蛋白1(LRP-1)、载脂蛋白E(ApoE)及淀粉前体蛋白(APP)、β位点APP剪切酶1(BACE1)蛋白表达.双荧光素酶验证miR-202-5p对PCSK9的靶向调控作用.建立体外AD细胞模型,共转染miR-202-5p mimic及PCSK9过表达载体(pcDNA-PCSK9),探究PCSK9过表达对miR-202-5p作用的逆转.结果 与正常对照组相比,模型组大鼠空间记忆及学习能力降低,脑皮质神经元损伤及数目减少,脑脊液中PCSK9、Aβ42、Aβ40、胆固醇水平升高,脑皮质组织中P-tau及炎症因子水平升高,miR-202-5p表达降低,PCSK9活化介导的BACE1-APP-Aβ生成途径活性升高,LRP-1-ApoE介导的促胆固醇摄取及Aβ清除活性降低(P<0.05).miR-202-5p过表达或PCSK9抑制剂干预治疗,均可抑制Aβ42、Aβ40沉积引起的神经元损伤,减少炎症因子分泌,并抑制PCSK9活化介导的BACE1、APP、Aβ生成,提高LRP-1-ApoE介导的促胆固醇摄取及Aβ清除(P<0.05).miR-202-5p与PCSK9之间存在靶向调控作用.PCSK9上调,可部分减弱miR-202-5p过表达发挥的抗AD作用(P<0.05).结论 过表达miR-202-5p可通过抑制PCSK9活化抑制Aβ 生成并促进LRP-1-ApoE介导的促胆固醇摄取及Aβ清除,进而发挥抗AD神经损伤作用.

miR-202-5p;前蛋白转化酶枯草溶菌素9;阿尔茨海默症;β-淀粉样蛋白

徐沛沛;赵树华;王江波;姚先丽;白金

郑州大学附属郑州中心医院康复医学科,郑州 450001;河南中医药大学附属郑州人民医院康复医学科,郑州 450014

中国比较医学杂志

[1]徐沛沛;赵树华;王江波;姚先丽;白金-.过表达miR-202-5p通过抑制P CSK9减轻阿尔茨海默病神经损伤)[J].中国比较医学杂志,2022(10):49-58

CSK9

miR,5p,阿尔茨海默病,神经损伤,前蛋白转化酶,枯草,溶菌素,PCSK9,阿尔茨海默症,AD,神经元损伤,侧脑室注射,淀粉样蛋白,正常对照,ago,NC,行空,空间记忆,忆及,能力检测,尼氏染色,皮层,神经元核抗原,NeuN,免疫荧光染色法,脑脊液,总胆固醇,磷酸化,Tau,tau,qRT,blot,LDL,LRP,载脂蛋白,ApoE,BACE1,双荧光素酶,靶向调控,细胞模型,共转染,mimic,过表达载体,pcDNA,脑皮质,皮质神经元,伤及,炎症因子水平,生成途径,胆固醇摄取,清除活性,干预治疗,可抑制,损伤作用

0.249735