目的 探讨微小RNA(miR-488-3p)通过靶向调控RAS癌基因家族成员RAP1A在同型半胱氨酸介导肝细胞自噬中的作用.方法 体外常规培养人正常肝细胞(HL-7702),并给予100μmol/L Hcy干预24 h,采用Western blot检测肝细胞自噬相关蛋白LC3、p62和RAP1A的表达水平,qRT-PCR检测肝细胞中miR-488-3p和RAP1A的表达;转染miR-488-3p inhibitor和mimics后,qRT-PCR和Western blot分别检测miR-488-3p的转染效率及其对LC3和p62蛋白表达的影响;TargetScan预测miR-488-3p与RAP1A基因相关性,Western blot检测miR-488-3p下游潜在靶蛋白(RAP1A)的表达改变;Pearson相关系数对肝细胞中miR-488-3p表达水平与自噬相关蛋白水平进行相关性分析.结果 与Control组相比,Hcy组肝细胞自噬相关蛋白LC3、RAP1A和miR-488-3p的表达水平升高(P<0.01),而p62表达明显降低(P<0.01);同时,转染miR-488-3p inhibitor和mimics后,与NC-inhibitor组比较,miR-488-3p inhibitor组中LC3和RAP1A蛋白的表达水平显著降低(P<0.01),p62表达明显升高(P<0.01);而与NC-mimics组相比,miR-488-3p mimics组中LC3和RAP1A蛋白表达水平明显增加(P<0.01),p62表达降低(P<0.01);进一步机制研究表明RAP1A是miR-488-3p的下游靶基因并受其正向调控.Pearson相关性分析发现,miR-488-3p的表达水平与LC3(r=0.9329,P=0.0002)蛋白表达呈正相关,而与p62(r=-0.8086,P=0.0083)表达则呈负相关.结论 miR-488-3p在Hcy介导的肝细胞中高表达,可通过靶向调控RAP1A的表达促进肝细胞自噬.

同型半胱氨酸;miR-488-3p;肝细胞;RAP1A;自噬

高源;揭育祯;马天龙;汪乐新;杨慧霞;周瑜瑾;焦运;卢冠军;马胜超

宁夏医科大学基础医学院,银川 750004;国家卫生健康委员会代谢性心血管疾病研究重点实验室(宁夏医科大学) ,银川 750004;宁夏医科大学临床医学院,银川 750004;宁夏医科大学总医院,银川 750004

中国比较医学杂志

[1]高源;揭育祯;马天龙;汪乐新;杨慧霞;周瑜瑾;焦运;卢冠军;马胜超-.miR-488-3p靶向调控RAP1A在同型半胱氨酸介导肝细胞自噬的作用研究)[J].中国比较医学杂志,2022(09):1-9

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