采用高效液相色谱-电感耦合等离子体质谱(HPLC-ICP-MS)法分析人血清中的硒酸盐(Se(Ⅵ))、亚硒酸盐(Se(Ⅳ))、硒代胱氨酸(SeCys2)、甲基硒代半胱氨酸(MeSeCys)、硒代蛋氨酸(SeMet)等5种硒形态.血清样品经蛋白酶超声水浴酶解后,ZORBAX SB-Aq C18反相色谱柱(250 mm×4.6 mm×5 μm)分离,以10 mmol/L柠檬酸和5 mmol/L己烷磺酸钠(含1％甲醇,pH 4.0)为流动相,等度洗脱.结果表明:10 min内即可实现5种硒形态的有效分离,线性范围为0.0～100.0 μg/L,相关系数(r)均大于0.999,检出限在0.05～0.2 μg/L之间;对添加3个浓度水平的5种硒形态混合标准溶液进行加标回收实验,正常血清中Se(Ⅳ)的加标回收率在35.1％～39.3％之间,去除大分子蛋白后的人血清中Se(Ⅳ)的加标回收率在87.9％～90.0％之间,正常人血清和去除大分子蛋白后的人血清中SeCys2的加标回收率在57.7％～72.5％之间,Se(Ⅵ)、MeSeCys、SeMet的加标回收率均在80％～120％之间;采用不同浓度水平的测试精密度考察方法的重复性,5种硒形态的相对标准偏差(RSD)均小于5％.人血清中的硒形态主要以硒代胱氨酸为主,其次为硒代蛋氨酸,还有少量的无机硒和未知硒化合物,血清中含有的大分子蛋白可能会与Se(Ⅳ)结合,导致Se(Ⅳ)加标回收率偏低.

高效液相色谱-电感耦合等离子体质谱(HPLC-ICP-MS);血清;硒形态;蛋白酶

北京市疾病预防控制中心,食物中毒诊断溯源技术北京市重点实验室,北京 100013;首都医科大学公共卫生学院,北京 100069

[1]姚晓慧;陈绍占;刘丽萍;刘洋;李乾玉-.高效液相色谱-电感耦合等离子体质谱法分析人血清中的硒形态)[J].质谱学报,2022(03):381-388

电感耦合等离子体质谱法,人血清,硒形态,HPLC,ICP,亚硒酸盐,SeCys2,硒代半胱氨酸,MeSeCys,硒代蛋氨酸,SeMet,清样,超声水浴,酶解,ZORBAX,SB,Aq,C18,反相色谱,色谱柱,柠檬酸,己烷,磺酸钠,流动相,洗脱,有效分离,线性范围,检出限,浓度水平,混合标准溶液,加标回收率,大分子,正常人,精密度,相对标准偏差,RSD,无机硒,硒化合物

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