微丝结合蛋白是微丝细胞骨架的重要组成成分,它们通过促进微丝的聚合和解聚来影响微丝的动力学.大量研究已经表明,微丝和微丝结合蛋白参与细胞癌变的所有阶段.我们通过对食管癌蛋白质组数据挖掘结果显示,微丝结合蛋白Eps15同源结构域包含蛋白2(EHD2)在食管癌组织中低表达,且EHD2低表达的食管癌患者预后不良.以往的研究已经证明,EHD2参与调控糖代谢、自噬和肿瘤迁移.然而,EHD2在食管癌进展中的作用和机制仍不清楚.本研究旨在探究EHD2在食管鳞癌细胞中的影响及其作用机制.免疫荧光和细胞组分分离结果显示,EHD2不仅定位于细胞膜和细胞质,还存在于细胞核中.使用克隆形成实验、EdU细胞增殖实验和细胞流式术检测EHD2对食管鳞癌细胞增殖能力的影响.结果显示,过表达EHD2和EHD2-3xNLS(核定位信号)抑制食管鳞癌细胞增殖和细胞周期G1/S转换;同时,双荧光素报告基因结果显示,过表达EHD2和EHD2-3×NLS抑制Wnt信号通路活性.而siRNA敲降则获得相反的结果.免疫共沉淀和Duolink-PLA实验证明,EHD2与Wnt信号通路关键分子β-连环蛋白(β-catenin)和T细胞因子3(T-cell factor 3,TCF3)相互作用.蛋白质印迹和荧光定量PCR结果证实,过表达EHD2和EHD2-3×NLS抑制TCF3下游与增殖和细胞周期相关的靶基因的转录,以及细胞周期蛋白D1(cyclin D1)、细胞周期蛋白激酶4(CDK4)和pRb的蛋白质表达.以上结果表明,核EHD2与β-catenin和TCF3复合体相互作用,通过Cyclin D1-CDK4-pRb信号轴来调控食管鳞癌细胞的增殖和细胞周期进程.

微丝结合蛋白;Eps15同源结构域包含蛋白2(EHD2);细胞增殖;T细胞因子3;食管鳞癌

张知达;邓丹霞;文兵;彭柳;董科;潘德渊;郑海香;廖连娣;许丽艳;李恩民

汕头大学医学院生物化学与分子生物学教研室,广东省潮汕沿海地区高发肿瘤分子生物学重点实验室,广东汕头515041;汕头大学医学院肿瘤研究中心,广东汕头515041;汕头大学医学院病理学教研室,广东省感染病与分子免疲病理重点实验室,广东汕头515041

中国生物化学与分子生物学报

[1]张知达;邓丹霞;文兵;彭柳;董科;潘德渊;郑海香;廖连娣;许丽艳;李恩民-.Eps15同源结构域包含蛋白2通过调控Cyclin D1-CDK4-pRb信号轴影响食管鳞癌细胞的增殖)[J].中国生物化学与分子生物学报,2022(09):1174-1192

Eps15,微丝结合蛋白,EHD2,3xNLS,Duolink

结构域,Cyclin,D1,CDK4,pRb,食管鳞癌细胞,细胞的增殖,细胞骨架,组成成分,解聚,白参,癌变,蛋白质组,食管癌组织,低表达,食管癌患者,预后不良,经证,糖代谢,自噬,免疫荧光,组分分离,细胞膜,细胞质,细胞核,克隆形成,EdU,细胞增殖能力,过表达,核定位信号,G1,双荧光,荧光素,报告基因,Wnt,siRNA,免疫共沉淀,PLA,关键分,连环蛋白,catenin,cell,TCF3,蛋白质印迹,靶基因,细胞周期蛋白,cyclin,蛋白激酶,蛋白质表达,复合体

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