药物诱发长QT间期综合征(long QT syndrome,LQTS)已成为临床上重要的研究课题,其中获得性长QT间期综合征(acLQTS)的发生主要是药物抑制人类ether-α-go-go相关基因(the human ether-α-go-go related gene,hERG)通道所致.hERG基因编码快速激活延迟整流钾离子通道(rapid component of the delayed rectifier potassium current,Ikr)的α亚基,其在动作电位3期复极过程中发挥重要作用,也是大多数抗心律失常药物作用的靶点.本文旨在探讨羟基吴茱萸次碱(hydroxyrutaecarpine,HRU)对hERG通道的影响,评估其心脏安全性.利用全细胞膜片钳技术记录HRU对hERG通道电流及动力学的影响,并验证与hERG通道的结合位点.运用PCR技术测定HRU对hERGmRNA表达水平的影响.利用Western blot技术检测HRU对hERG蛋白和转录因子Sp1(specificity protein 1)表达的影响.采用免疫荧光技术证实HRU对hERG蛋白和转录因子Sp1的定位和表达的影响.研究显示,HRU瞬时给药后对hERG电流具有抑制作用,降低hERG通道的失活电流,缩小失活时间常数,作用位点是S6片段的两个芳香族氨基酸即第656位的苯丙氨酸F656和第652位的酪氨酸Y652.HRU孵育给药能够减少hERG蛋白表达量,并抑制hERG电流,降低hERGmRNA的水平,降低细胞核内转录因子Sp1和细胞浆内hERG蛋白表达水平.激光扫描共聚焦实验也显示细胞核内转录因子Sp1和细胞浆内hERG蛋白表达都减少,说明HRU抑制Sp1表达是导致hERGmRNA表达减少的原因.以上结果表明,HRU瞬时给药抑制hERG电流的作用是通过结合hERG通道内F656和Y652位点,缩小失活时间常数,加快通道失活,从而抑制hERG通道功能.此外,HRU还抑制hERG蛋白表达,主要是通过抑制转录因子Sp1的表达,使hERG通道蛋白的转录功能下调,最终导致hERG蛋白减少.

羟基吴茱萸次碱;hERG通道;转录因子Sp1;获得性长QT间期综合症;心律失常

李相花;战歌;李加欣;任家成;樊攀;李宝馨

哈尔滨医科大学药学院,黑龙江哈尔滨150081;哈尔滨医科大学附属第二临床医院,黑龙江哈尔滨150081

药学学报

[1]李相花;战歌;李加欣;任家成;樊攀;李宝馨-.靶向hERG通道评价羟基吴茱萸次碱的心脏安全性)[J].药学学报,2022(05):1367-1374

羟基吴茱萸次碱,acLQTS,Ikr,hydroxyrutaecarpine,hERGmRNA,F656,Y652

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