典型文献
产气荚膜梭菌多重PCR检测方法的建立及初步应用
文献摘要：
旨在建立一种高效、快速、准确的检测产气荚膜梭菌并分型的多重PCR方法.根据GenBank上公布的产气荚膜梭菌a、β、ε、?毒素的基因序列,设计、合成4对针对4种毒素的特异性引物.并通过改变引物浓度、退火温度等反应条件,对多重PCR方法进行优化.结果显示,对产气荚膜梭菌a、β、ε、?毒素基因均扩增出了预期大小的目的条带,而金黄色葡萄球菌、多杀性巴氏杆菌、停乳链球菌、肺炎克雷伯菌、大肠杆菌均未出现条带;当核酸质量浓度降至12.5 μg/L时,仍可清晰地扩增出a、β、e、?毒素基因对应条带.在核酸质量浓度降至3.12 μg/L时,仍可观察到a与e毒素基因扩增出的条带.在核酸质量浓度降至0.78μg/L时,a毒素基因对应的条带仍可隐约可见.应用该方法对68份疑似产气荚膜梭菌导致猝死的牛鼻拭子样进行检测,其中有52份样品检测结果显示为C型产气荚膜梭菌,剩余16份样品均为非产气荚膜梭菌,阳性率为76％.结果表明,本研究建立的多重PCR方法特异性强、灵敏度高重复性好,可准确地鉴别区分5种类型的产气荚膜梭菌.在采样时仅需采取疑似病畜的鼻拭子,操作简便、快捷、安全.对临床检测病畜的产气荚膜梭菌病有较为重要的意义.
文献关键词：
产气荚膜梭菌;多重PCR;a毒素;β毒素;e毒素;毒素
中图分类号：
作者姓名：
缪西鹏;高瑞;谢玉杰;熊新雪;赵辉;牛耀祖;许立华
作者机构：
宁夏大学农学院,宁夏银川750021;吴忠市利通区上桥镇畜牧兽医工作站,宁夏吴忠751100;宁夏威科嘉动物科技有限公司,宁夏银川750001
文献出处：
引用格式：
[1]缪西鹏;高瑞;谢玉杰;熊新雪;赵辉;牛耀祖;许立华-.产气荚膜梭菌多重PCR检测方法的建立及初步应用)[J].中国兽医学报,2022(08):1591-1596
A类：
B类：
产气荚膜梭菌,初步应用,测产,GenBank,基因序列,特异性引物,退火温度,反应条件,毒素基因,条带,金黄色葡萄球菌,多杀性巴氏杆菌,停乳链球菌,肺炎克雷伯菌,大肠杆菌,核酸质量,基因扩增,隐约可见,猝死,牛鼻,鼻拭子,子样,样品检测,法特,灵敏度高,别区,临床检测
AB值：
0.218718
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