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表达绿色荧光蛋白的重组耻垢分枝杆菌感染THP-1巨噬细胞模型的建立
文献摘要：
目的 建立表达绿色荧光蛋白(GFP)的耻垢分枝杆菌感染THP-1巨噬细胞模型,对耻垢分枝杆菌进行快速定位和直观检测,为探究结核发病机制以及研制新型结核疫苗提供一种示踪工具.方法 以pEGFP-N1质粒为模板采用PCR扩增出增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因序列,获得EGFP的编码基因,将扩增产物克隆到载体pALACE上,建立重组质粒pALACE-EGFP.利用电穿孔技术将pALACE-EGFP转化到耻垢分枝杆菌中,通过潮霉素抗性筛选重组耻垢分枝杆菌克隆,扩大培养后涂片观察,并进行荧光显微镜镜检.再用重组耻垢分枝杆菌感染THP-1巨噬细胞,观察是否有GFP表达.结果 正确构建重组质粒pALACE-EGFP;荧光显微镜下观察重组耻垢分枝杆菌,证实EGFP在重组耻垢分枝杆菌中表达,并且THP-1巨噬细胞被感染后发出绿色荧光.结论 表达EGFP蛋白的重组耻垢分枝杆菌的成功建立,为结核分枝杆菌的感染和致病机制研究奠定基础.
文献关键词：
绿色荧光蛋白(GFP);耻垢分枝杆菌;结核病
中图分类号：
作者姓名：
李敏英;王楚彤;袁美丽;卢思彤;钱中清;李柏青;许涛;汪洪涛
作者机构：
慢性疾病免疫学基础与临床安徽省重点实验室,安徽蚌埠233030;蚌埠医学院检验医学院免疫学教研室,安徽蚌埠233030;蚌埠医学院检验医学院临床检验诊断学教研室,安徽蚌埠233030
文献出处：
引用格式：
[1]李敏英;王楚彤;袁美丽;卢思彤;钱中清;李柏青;许涛;汪洪涛-.表达绿色荧光蛋白的重组耻垢分枝杆菌感染THP-1巨噬细胞模型的建立)[J].细胞与分子免疫学杂志,2022(09):789-793
A类：
pALACE
B类：
耻垢分枝杆菌,分枝杆菌感染,THP,巨噬细胞,细胞模型,快速定位,核发,结核疫苗,示踪,pEGFP,N1,增强型绿色荧光蛋白,基因序列,编码基因,扩增产物,重组质粒,电穿孔,潮霉素,抗性筛选,筛选重组,扩大培养,涂片,荧光显微镜,显微镜镜检,显微镜下,结核分枝杆菌,致病机制,结核病
AB值：
0.219101
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