典型文献
人源FOXG1基因真核表达载体的构建、表达及其对HeLa细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响
文献摘要:
目的:构建人源FOXG1真核表达载体,瞬时转染HeLa细胞实现FOXG1过表达,观察FOXG1对He-La细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响,为后续研究人源FOXG1基因在肿瘤中的作用机制奠定理论基础.方法:利用One Step Cloning法构建重组质粒pEGFP-C1-FOXG1,并通过酶切、测序对重组质粒进行鉴定;采用脂质体介导的转染法将pEGFP-C1-FOXG1瞬时转染至HeLa细胞,荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白的表达,Western blot检测HeLa细胞中EGFP-FOXG1融合蛋白的表达;进一步,分别通过CCK8、伤口愈合和Tran-swell实验检测FOXG1对HeLa细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响.结果:酶切鉴定和测序表明重组质粒pEGFP-C1-FOXG1构建成功;瞬时转染HeLa细胞24小时后,能够在荧光显微镜观察到绿色荧光,48小时后转染效率达到90%;Western blot显示EGFP-FOXG1融合蛋白正确表达;CCK8实验表明过表达FOXG1能够促进HeLa细胞的增殖;伤口愈合和Transwell实验表明FOXG1过表达可以促进HeLa细胞的迁移和侵袭.结论:成功构建了 pEGFP-C1-FOXG1重组质粒,并在HeLa细胞中正确表达;功能实验表明FOXG1能够促进HeLa细胞增殖、迁移和侵袭.
文献关键词:
FOXG1;HeLa细胞;过表达;增殖;迁移;侵袭
中图分类号:
作者姓名:
王雨晴;姜慧杰;陈艳;刘永新;来明名
作者机构:
大理大学基础医学院,云南 大理 671000;中山大学孙逸仙纪念医院深汕中心,广东 广州 510000
文献出处:
引用格式:
[1]王雨晴;姜慧杰;陈艳;刘永新;来明名-.人源FOXG1基因真核表达载体的构建、表达及其对HeLa细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响)[J].现代肿瘤医学,2022(10):1722-1728
A类:
B类:
FOXG1,真核表达载体,HeLa,迁移和侵袭,侵袭能力,过表达,One,Step,Cloning,重组质粒,pEGFP,C1,脂质体,显微镜下,绿色荧光蛋白,blot,融合蛋白,CCK8,伤口愈合,实验检测,荧光显微镜观察,转染效率,细胞的增殖,Transwell,中正,功能实验
AB值:
0.179949
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