目的 探讨胃癌间充质干细胞(GCMSC)上清液(GCMSC-CM)是否通过调节退变样蛋白4(VGLL4)上调胃癌细胞程序性死亡蛋白1配体1(PD-L1)表达并促进胃癌进展.方法 首先采用Western blot法检测SGC-7901、HGC-27和MGC-803胃癌细胞VGLL4表达;使用VGLL4特异小干涉RNA(siRNA)抑制HGC-27和SGC-7901细胞VGLL4的表达,转染质粒过表达SGC-7901胃癌细胞VGLL4,将胃癌细胞分为对照组、GCMSC上清处理组、VGLL4干扰或过表达组以及VGLL4干扰联合GCMSC上清处理组.实时定量PCR和Western blot法分别检测SGC-7901胃癌细胞PD-L1的mRNA和蛋白表达,平板克隆实验检测细胞的增殖能力,TranswellTM迁移实验检测细胞迁移能力.构建人外周血单个核细胞过继的NCG免疫缺陷小鼠(PBMC-NCG)皮下瘤模型观察小鼠肿瘤生长情况,将小鼠分为对照组、GCMSC上清处理组、VGLL4敲低组、VGLL4敲低后联合GCMSC上清处理组.实时定量PCR检测肿瘤组织VGLL4和PD-L1的mRNA水平,免疫组织化学染色检测VGLL4、PD-L1、KI-67抗原(ki67)、CD8和颗粒酶B(GZMB)的表达.结果 VGLL4在SGC-7901、HGC-27和MGC-803细胞均有表达.干扰SGC-7901和HGC-27细胞VGLL4后PD-L1 mRNA和蛋白表达明显下降.过表达SGC-7901细胞VGLL4后PD-L1 mRNA和蛋白表达上调.GCMSC上清处理HGC-27和MGC-803细胞后VGLL4表达升高,干扰HGC-27细胞VGLL4表达能够逆转上清对PD-L1的上调.干扰SGC-7901细胞VGLL4表达使GCMSC上清促细胞增殖和迁移的能力减弱.敲低VGLL4抑制了 GCMSC上清促小鼠肿瘤生长作用并增强PBMC-NCG小鼠抗肿瘤免疫作用.结论 GCMSC上清液通过上调胃癌细胞VGLL4表达促进PD-L1表达及肿瘤生长.

间充质干细胞(MSC);胃癌;退变样蛋白4(VGLL4);程序性死亡蛋白1配体1(PD-L1)

丁颖;朱伟;王倩倩;陈斌;王梅;赵媛媛

江苏大学医学院,江苏镇江212013

细胞与分子免疫学杂志

[1]丁颖;朱伟;王倩倩;陈斌;王梅;赵媛媛-.胃癌间充质干细胞培养上清液上调退变样蛋白4(VGLL4)表达促进胃癌细胞PD-L1表达及肿瘤生长)[J].细胞与分子免疫学杂志,2022(04):321-327

胃癌间充质干细胞,GCMSC

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