目的:探讨Netrin-1对急性T淋巴细胞白血病(T Cell Acute Lymphoblastic Leukemia,T-ALL)细胞中VEGFA水平的影响及可能的作用机制.方法:采用ELISA法检测10例T-ALL患儿和23例非恶性血液系统疾病患儿骨髓中Netrin-1、VEGFA的水平并进行比较,分析疾病组和对照组患儿骨髓中Netrin-1与VEGFA水平的相关性.体外培养 T-ALL 细胞株 Jurkat、Molt-4,用不同浓度的 Netrin-1(0,25,50,100 ng/ml)处理细胞 24 h 后,qRT-PCR 及Western blot检测不同浓度下各细胞中VEGFA的表达量;qRT-PCR检测两种细胞中Netrin-1受体的表达,并采用co-IP检测Netrin-1与T-ALL细胞中受体的结合;Western blot检测各组细胞中Akt-mTOR通路中关键蛋白的磷酸化水平.使用Akt/mTOR抑制剂与Netrin-l(100 ng/ml)联合处理T-ALL细胞后,采用Western blot检测各组细胞中VEGFA的表达量以及Akt/mTOR通路中关键分子的磷酸化水平.结果:T-ALL患儿骨髓中Netrin-1及VEGFA表达水平显著高于对照组(P＜0.05),且在T-ALL患者中两者表达水平呈线性相关(r2=0.974).随着Netrin-1浓度的升高,VEGFA的表达水平也升高(P＜0.05).当Netrin-1浓度为100 ng/ml时,Netrin-1与Integrin-β4受体结合.Netrin-1浓度为100 ng/ml处理细胞24 h后,Akt、mTOR通路关键分子的磷酸化水平均提高;当Netrin-1(100 ng/ml)与Akt抑制剂联合处理T-ALL细胞后,VEGFA的表达量下降,Akt、mTOR的磷酸化水平也下降;而与mTOR抑制剂联合处理细胞后,Akt的磷酸化水平升高,mTOR的磷酸化水平降低,VEGFA的表达量也下降.结论:T-ALL患儿骨髓中Netrin-1及VEGFA表达量存在异常且两者存在线性关系;Netrin-1通过Integrin-β4受体,激活Akt/mTOR通路诱导T-ALL细胞表达VEGFA.

Netrin-1;血管内皮生长因子A;Akt/mTOR;急性T淋巴细胞白血病

朱瑶;刘海燕;相燕;杨晖;姚新原;安曦洲;张凯楠;黄兰;梁绍燕;于洁

重庆医科大学附属儿童医院血液肿瘤科,儿童发育疾病研究教育部重点实验室,国家儿童健康与疾病临床医学研究中心,儿科学重庆市重点实验室;重庆医科大学附属儿童医院儿科研究所,重庆400010

中国实验血液学杂志

[1]朱瑶;刘海燕;相燕;杨晖;姚新原;安曦洲;张凯楠;黄兰;梁绍燕;于洁-.Netrin-1对T-ALL细胞中VEGFA表达的影响及相关机制研究)[J].中国实验血液学杂志,2022(04):1049-1055

Lymphoblastic,Molt

Netrin,ALL,VEGFA,相关机制,淋巴细胞白血病,Cell,Acute,Leukemia,血液系统疾病,体外培养,细胞株,Jurkat,ml,qRT,blot,co,Akt,mTOR,关键蛋白,磷酸化,联合处理,关键分,线性相关,r2,Integrin,平降,血管内皮生长因子

0.16022