目的:探讨下调ANRIL(Antisense non-coding RNA in the INK4 Locus)表达对Kasumi-1细胞增殖和凋亡的影响及其相关分子机制.方法:使用重组慢病毒构建下调ANRIL表达的Kasumi-1细胞(sh-ANRIL组)及其对照组细胞(sh-NC组),荧光显微镜观察慢病毒对细胞的转染效率,RT-qPCR检测敲低效率及急性髓细胞白血病(AML)患者外周血和骨髓中ANRIL的表达水平.CCK-8法和流式细胞术检测下调ANRIL表达对Kasumi-1细胞增殖和凋亡的影响.Western blot检测下调ANRIL表达后Kasumi-1细胞中PI3K、AKT、p-AKT等相关蛋白分子的表达.结果:ANRIL在AML患者外周血和骨髓中呈高表达;重组慢病毒对Kasumi-1细胞的转染效率＞90％,敲低效率为70％;CCK-8结果显示,下调Kasumi-1细胞中ANRIL表达能够显著抑制细胞增殖,当DNR作用24、48、72 h,sh-ANRIL组的细胞增殖抑制率分别为(47.40±1.49)％、(69.11±0.51)％和(91.82±1.10)％,均显著高于 sh-NC 组(40.69±1.70)％(P＜0.05)、(58.93±1.74)％(P＜0.01)和(82.93±0.37)％(P＜0.001);流式细胞术分析显示,sh-ANRIL组细胞凋亡率为(10.29±0.58)％,显著高于 sh-NC 组的(5.42±0.67)％(P＜0.01),当 DNR 作用 24 h,sh-ANRIL 组细胞凋亡率为(54.41±1.69)％,显著高于 sh-NC 组的(38.28±1.42)％(P＜0.001);Westernblot结果显示,sh-ANRIL组PI3K、p-AKT、PCNA、BCL-2蛋白水平较sh-NC组显著降低,而BAX蛋白的表达增加.结论:ANRIL可能通过PI3K/AKT信号通路影响Kasumi-1细胞增殖和凋亡,ANRIL是AML的潜在治疗靶点.

ANRIL;PI3K/AKT;增殖;凋亡

张成思;许建霞;邓发滑;胡华丽;王斯奇;黄海;韦四喜

贵州医科大学医学检验学院;贵州省疾病预防控制中心;贵州医科大学附属医院临床检验中心,贵州贵阳550004

中国实验血液学杂志

[1]张成思;许建霞;邓发滑;胡华丽;王斯奇;黄海;韦四喜-.下调ANRIL对Kasumi-1细胞增殖和凋亡的影响及其相关作用机制研究)[J].中国实验血液学杂志,2022(04):984-989

Antisense

ANRIL,Kasumi,增殖和凋亡,coding,INK4,Locus,重组慢病毒,sh,NC,荧光显微镜观察,转染效率,qPCR,敲低,低效率,急性髓细胞白血病,AML,CCK,流式细胞术,PI3K,AKT,抑制细胞增殖,DNR,增殖抑制,抑制率,细胞凋亡率,Westernblot,PCNA,BCL,BAX,潜在治疗,治疗靶点

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