目的:探讨丹参多酚酸酯(Sal)对骨质疏松症大鼠破骨细胞分化和骨吸收的影响,阐明其作用机制.方法:体内实验,采用去势法建立骨质疏松症大鼠模型,30只雌性大鼠随机分为假手术组、模型组和Sal组(建模4周后隔天腹腔注射40 mg·kg-1 Sal,共4周).采用HE染色法观察各组大鼠股骨组织病理形态表现,双能X射线骨密度仪检测各组大鼠股骨骨密度(BMD),三点弯曲试验检测各组大鼠股骨最大载荷.体外实验,采用30μg·L-1巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)和100μg·L-1核因子κB(NF-κB)配体(RANKL)诱导骨髓巨噬细胞(BMMs)分化,细胞分为对照组、RANKL组、RANKL+Sal组(10 mg·L-1Sal)、RANKL+Sal+空载体(vector)组(10 mg·L-1 Sal和2 mg·L-1 vector)、RANKL+Sal+LV-FKBP1A组[10 mg·L-1 Sal和2 mg·L-1慢病毒介导的FKBP1A过表达载体(LV-FKBP1A)]、RANKL+Sal+LV-FKBP1A+QNZ组(10 mg·L-1 Sal、2 mg·L-1 LV-FKBP1A和10 nmol·L-1NF-κB抑制剂QNZ),MTT法检测各组细胞增殖活性,流式细胞术检测各组细胞凋亡率,Co-IP实验验证SMAD2和FKBP1A的相互作用,Western blotting法检测各组大鼠骨组织和各组细胞中SMAD家族蛋白2(SMAD2)、FK506结合蛋白1A(FKBP1A)和磷酸化核因子-κB P65(p-P65)蛋白表达水平,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测各组大鼠血清和各组细胞中抗酒石酸酸性磷酸酶5b(TRAP5b)水平,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测各组大鼠骨组织和各组细胞中组织蛋白酶K(CTSK)和降钙素受体(CTR)mRNA表达水平.结果:体内实验,与模型组比较,Sal组大鼠骨小梁数量明显增加,大鼠股骨BMD和最大负载明显升高(P<0.01),血清中TRAP5b水平明显降低(P<0.01),骨组织中SMAD2及FKBP1A蛋白表达水平和CTSK及CTR mRNA表达水平明显降低(P<0.01).Co-IP实验结果证实SMAD2与FKBP1A蛋白存在相互作用.体外实验,与RANKL组比较,RANKL+Sal组细胞增殖活性明显降低(P<0.01),细胞凋亡率明显升高(P<0.01),细胞中TRAP5b水平,SMAD2、FKBP1A及p-P65蛋白表达水平和CTSK及CTR mRNA表达水平明显降低(P<0.01);与RANKL+Sal+vector组比较,RANKL+Sal+LV-FKBP1A组细胞凋亡率明显降低(P<0.01),细胞中TRAP5b水平,SMAD2、FKBP1A及p-P65蛋白表达水平和CTSK及CTR mRNA表达水平明显升高(P<0.01);与RANKL+Sal+LV-FKBP1A组比较,RANKL+Sal+LV-FKBP1A+QNZ组细胞凋亡率明显升高(P<0.01),细胞中TRAP5b水平,SMAD2、FKBP1A及p-P65蛋白表达水平和CTSK及CTR mRNA表达水平明显降低(P<0.01).结论:Sal通过调控SMAD2和FKBP1A蛋白的相互作用,抑制NF-κB活化,缓解大鼠骨质疏松症.

骨质疏松症;丹参多酚酸酯;SMAD家族蛋白2;FK506结合蛋白1A;破骨细胞;骨吸收

马运锋;韩小飞

河南中医药大学第二附属医院 河南省中医院骨病一科,河南 郑州 450002;河南中医药大学第二附属医院 河南省中医院风湿病科,河南 郑州 450002

吉林大学学报（医学版）

[1]马运锋;韩小飞-.丹参多酚酸酯调控SMAD2/FKBP1A/NF-κB轴对骨质疏松症大鼠破骨细胞分化和骨吸收的影响)[J].吉林大学学报（医学版）,2022(01):111-121

丹参多酚酸酯,FKBP1A,RANKL+Sal,1Sal,RANKL+Sal+,RANKL+Sal+LV,FKBP1A+QNZ,1NF,QNZ,RANKL+Sal+vector

SMAD2,骨质疏松症,破骨细胞分化,骨吸收,体内实验,用去,去势,大鼠模型,雌性大鼠,假手,隔天,腹腔注射,HE,染色法,股骨,骨组织,病理形态,双能,骨密度,密度仪,BMD,三点弯曲试验,试验检测,最大载荷,体外实验,巨噬细胞集落刺激因子,CSF,核因子,BMMs,空载,慢病毒,过表达载体,nmol,MTT,细胞增殖活性,流式细胞术,细胞凋亡率,Co,blotting,FK506,结合蛋白,磷酸化,P65,蛋白表达水平,酶联免疫吸附试验,大鼠血清,抗酒石酸酸性磷酸酶,TRAP5b,qPCR,组织蛋白酶,CTSK,降钙素受体,CTR,骨小梁数,大负载,载明

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