目的 探讨葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(glucose-6-phosphate dehydrogenase,G6PD)在卵巢癌细胞顺铂耐药中的作用及其潜在的机制.方法 通过低浓度加量持续诱导法构建卵巢癌顺铂耐药细胞株A2780/CDDP,采用Label-free定量蛋白质组学法分析A2780和A2780/CDDP细胞差异蛋白G6PD,Western blot和RT-qPCR检测G6PD表达情况.通过siRNA技术将siRNA-G6PD及其阴性对照(siRNA-NC)转染至A2780/CDDP细胞,然后采用Western blot验证G6PD基因沉默效果,MTT法检测细胞增殖情况,流式细胞术检测细胞凋亡情况,流式细胞仪和酶标仪检测铁死亡相关物质活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)、还原型谷胱甘肽(GSH)和脂质过氧化物的表达水平.结果 与A2780细胞相比,A2780/CDDP细胞中有95个上调蛋白和102个下调蛋白,其中上调蛋白中以G6PD表达差异最为显著;这些蛋白大多富集在代谢通路,且其功能主要与细胞氧化应激反应、核糖磷酸代谢途径相关.与A2780细胞相比,A2780/CDDP细胞中G6PD mRNA和蛋白表达水平均显著升高(均P＜0.05),铁死亡相关物质ROS、MDA和脂质过氧化物水平均降低(均P＜0.05),而GSH水平升高(P=0.001).沉默G6PD后的A2780/CDDP细胞中顺铂的IC50值降低(P=0.012),细胞凋亡率升高(P=0.006),铁死亡相关物质ROS、MDA和脂质过氧化水平均升高(均P＜0.05),而GSH水平降低(P=0.007).结论 沉默G6PD可能通过诱导卵巢癌顺铂耐药细胞A2780/CDDP中的铁死亡水平而增强顺铂敏感性.

卵巢癌;顺铂耐药;蛋白质组学;葡萄糖-6-磷酸脱氢酶;细胞凋亡;铁死亡

陈朝梅;奚敏;施秀;王芳;周金华

215024苏州 苏州大学附属第一医院妇产科

中国癌症防治杂志

[1]陈朝梅;奚敏;施秀;王芳;周金华-.沉默G6PD对卵巢癌细胞顺铂敏感性的影响及其作用机制)[J].中国癌症防治杂志,2022(03):274-280

G6PD,卵巢癌细胞,顺铂敏感性,glucose,phosphate,dehydrogenase,顺铂耐药,诱导法,耐药细胞株,A2780,CDDP,Label,free,定量蛋白质组学,差异蛋白,blot,qPCR,siRNA,NC,转染,基因沉默,MTT,流式细胞术,流式细胞仪,酶标仪,铁死亡,ROS,还原型谷胱甘肽,GSH,脂质过氧化物,表达差异,代谢通路,氧化应激反应,核糖,酸代谢,代谢途径,蛋白表达水平,IC50,细胞凋亡率,氧化水平,平降,死亡水平

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