目的 研究P2X4受体在小鼠胶质瘤中肿瘤相关巨噬细胞(TAMs)的表达对胶质瘤细胞侵袭迁移的影响及分子机制.方法 将16只健康C57BL/6小鼠随机分为肿瘤组、对照组(8只/组),利用小鼠胶质瘤GL261细胞接种于小鼠大脑尾状核,建立小鼠脑胶质瘤模型.术后第21天处死小鼠,取荷瘤小鼠及正常小鼠脑组织,采用HE染色观察小鼠胶质瘤形态,利用免疫荧光检测Iba-1、P2X4受体的表达情况;应用GL261条件培养基将RAW264.7细胞诱导为TAMs,采用RT-qPCR检测巨噬细胞极化相关标志物及P2X4受体在TAMs的mRNA表达情况;采用Western blot检测P2X4受体在TAMs的蛋白表达情况;采用siRNA P2X4,下调TAMs中P2X4受体的蛋白表达,RT-qPCR、Western blot检测siRNA P2X4转染后TAMs中IL-1β、IL-18的mRNA及蛋白表达;利用transwell侵袭及迁移实验检测siRNA P2X4转染后TAMs对GL261细胞侵袭迁移能力的影响.结果 与对照组相比,荷瘤小鼠脑胶质瘤组织中有较高数量的Iba-1阳性细胞(P<0.0001),且P2X4受体在Iba-1阳性细胞中的表达增高(P=0.001);使用GL261条件培养基刺激RAW264.7细胞转化为TAMs后,M2型巨噬细胞标志基因Arg-1、IL-10表达上调(P=0.0001、0.001),M1型巨噬细胞标志基因iNOS、TNF-α表达也上调(P=0.006、0.001),但以M2型巨噬细胞标志基因Arg-1、IL-10表达上调更为显著,同时TAMs中P2X4受体蛋白表达水平及mRNA水平均增高(P=0.005、0.014).干扰TAMs中P2X4受体表达引起其IL-1β、IL-18的mRNA(P<0.01)及蛋白表达水平(P<0.01,P<0.05)降低,并抑制TAMs促进胶质瘤细胞侵袭和迁移的能力(P=0.004、0.017).结论 降低肿瘤相关巨噬细胞P2X4受体表达可能通过IL-1β、IL-18影响胶质瘤细胞的迁移和侵袭.

胶质瘤;P2X4受体;肿瘤相关巨噬细胞;侵袭;迁移

杨学智;沈红;李群;代自超;杨荣强;黄国宾;陈蕊;王芳;宋精玲;华海蓉

病理学与病理生理学系,昆明医科大学,云南昆明 650500;昭通市第一人民医院病理科,云南 昭通 657099;临床技能中心,昆明医科大学,云南昆明 650500;口腔医学研究所,附属口腔医院,昆明医科大学,云南昆明 650500;电子显微镜室,昆明医科大学,云南昆明 650500

南方医科大学学报

[1]杨学智;沈红;李群;代自超;杨荣强;黄国宾;陈蕊;王芳;宋精玲;华海蓉-.干扰肿瘤相关巨噬细胞的P2X4受体表达可抑制胶质瘤细胞的迁移和侵袭)[J].南方医科大学学报,2022(05):658-664

肿瘤相关巨噬细胞,P2X4,受体表达,可抑制,制胶,胶质瘤细胞,迁移和侵袭,鼠胶,TAMs,侵袭迁移,C57BL,GL261,尾状核,脑胶质瘤,处死,荷瘤小鼠,小鼠脑组织,HE,免疫荧光检测,Iba,条件培养基,RAW264,细胞诱导,qPCR,巨噬细胞极化,相关标志物,blot,siRNA,转染,transwell,迁移实验,实验检测,迁移能力,阳性细胞,细胞转化,M2,标志基因,Arg,M1,iNOS,受体蛋白,蛋白表达水平,细胞侵袭和迁移

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