目的 分析长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)HCG18对放疗抗拒喉癌的放疗敏感性的影响及作用机制.方法 流式细胞术检测喉癌细胞系经过放射后的细胞凋亡率,应用荧光定量PCR(qRT-PCR)分别检测lncRNA HCG18、微小RNA-107(miR-107)和PAG1在喉癌细胞中的相对表达含量,分别于喉癌细胞中敲除和过表达HCG18、miR-107和PAG1,用克隆形成等检测其对喉癌细胞放疗敏感性的影响.利用实时荧光qRT-PCR和蛋白质印迹法检测HCG18对miR-107及PAG1表达的影响,并运用荧光素酶报告实验分析HCG18/miR-107/PAG1之间的调控作用.结果 Tu212max细胞系细胞凋亡率低于Tu212和Tu212min细胞系,将其选定为放疗抗拒的喉癌细胞系.HCG18和PAG1在喉癌组织和Tu212max中表达上调,miR-107在喉癌组织和Tu212max中表达下调(t=22.60、18.15、14.38,P均＜0.05).在Tu212max中沉默HCG18和PAG1的表达能够抑制Tu212max克隆(P均＜0.05)、提高凋亡率(t=35.55、24.25、51.44、49.75,P均＜0.05).双荧光素酶报告基因实验证实HCG18可负向调控miR-107的表达(t=32.46,P＜0.05),miR-107可以负向调控其下游靶基因PAG1的表达水平(t=34.71,P＜0.05),HCG18通过调控miR-107 而并正向调控 PAG1 的表达水平.HCG18 对 Tu212max放射敏感性的影响又依赖于miR-107.结论 沉默HCG18表达,促进miR-107上调,而抑制PAG1的表达,最终提高了放疗抗拒喉癌细胞的放射敏感性.

喉肿瘤;细胞系;肿瘤;微RNAs;长链非编码RNA;放射敏感性

岑瑞祥;刘丹;万浪

鄂东医疗集团黄石市中心医院(湖北理工学院附属医院)耳鼻咽喉头颈外科,湖北 黄石 435000

中国耳鼻咽喉头颈外科

[1]岑瑞祥;刘丹;万浪-.沉默长链非编码RNA HCG18通过miRNA-107/PAG1轴逆转喉癌细胞放射抗拒机制研究)[J].中国耳鼻咽喉头颈外科,2022(06):358-362

PAG1,Tu212max,Tu212,Tu212min

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