典型文献
TYR/BDNF基因慢病毒载体的构建及其在大鼠脑梗死模型中的应用
文献摘要：
目的 构建携带酪氨酸酶基因(tyrosinase,TYR)和脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF)基因的重组慢病毒载体,建立TYR和BDNF基因过表达的骨髓间充质干细胞株(BMSCs),并利用光学成像技术监测BMSCs在大鼠脑梗死模型脑内分布情况.方法 应用RT-PCR技术扩增TYR及BDNF基因,然后克隆到H7656载体,构建慢病毒表达载体H16189,转染293T细胞,包装并测定其滴度,转染BMSCs后,应用RT-PCR、Western blot和ELISA检测目的基因及蛋白的表达.构建大鼠大脑中动脉梗塞模型,纹状体注射慢病毒感染的BMSCs,小动物光学成像观察BMSCs脑内分布情况.结果 成功构建慢病毒表达载体H16189(PLENTI-CBH-TYR-3XFLAG-P2A-LUC2-TCMV-BDNF-6XHIS-F2A-PURO-WPRE),病毒滴度为2.6×108 TU/mL.慢病毒感染BMSCs后,RT-PCR检测到TYR和BDNF mRNA的表达,Western blot或ELISA法成功检测到TYR和BDNF蛋白表达.光学成像结果显示BM-SCs可以在脑内迁徙,且主要聚集在脑梗死区域.结论 成功构建了携带TYR及BDNF基因的慢病毒表达载体,光学成像显示携带TYR及BDNF基因的BMSCs可以将重组质粒运输到缺血梗死区,为下一步进行MRI显像及疗效评价提供了实验依据.
文献关键词：
骨髓间充质干细胞;酪氨酸酶基因;脑源性神经营养因子;脑梗死
中图分类号：
作者姓名：
刘玉;刘影;伍志发;鹿静雅
作者机构：
中国科学技术大学附属第一医院影像科,合肥 230001
文献出处：
引用格式：
[1]刘玉;刘影;伍志发;鹿静雅-.TYR/BDNF基因慢病毒载体的构建及其在大鼠脑梗死模型中的应用)[J].华中科技大学学报（医学版）,2022(03):360-365,374
A类：
H7656,H16189,PLENTI,3XFLAG,LUC2,TCMV,6XHIS,F2A
B类：
TYR,BDNF,慢病毒载体,脑梗死,酪氨酸酶基因,tyrosinase,脑源性神经营养因子,brain,derived,neurotrophic,重组慢病毒,基因过表达,骨髓间充质干细胞,细胞株,BMSCs,利用光,光学成像技术,技术监测,慢病毒表达载体,转染,293T,blot,检测目的,目的基因,大脑中动脉,梗塞,纹状体,慢病毒感染,小动,CBH,P2A,PURO,WPRE,病毒滴度,TU,内迁,迁徙,死区,重组质粒,输到,显像,疗效评价
AB值：
0.24383
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