目的:观察小分子热休克蛋白HSPB1是否减轻过氧化氢(hydrogen peroxide,H2O2)诱导的人血管内皮细胞早衰,并从沉默信息调节因子1(silent information regulator 1,SIRT1)信号通路来探讨其可能的作用机制.方法:将常规培养的人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)随机分为空白对照组、50μmol/L H2O2组和H2O2+HSPB1过表达组.通过RT-qPCR法检测p16和p21的mRNA表达;衰老相关β-半乳糖苷酶(senescence-associatedβ-galactosidase,SA-β-Gal)活性检测试剂盒检测SA-β-Gal活性;Western blot检测p53、p16、p21、血管细胞黏附分子1(vascular cell adhesion molecule-1,VCAM-1)和细胞间黏附分子1(intercellular adhesion molecule-1,ICAM-1)的蛋白水平;流式细胞术检测细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平.同时,通过沉默SIRT1基因,观察SIRT1对HSPB1减缓H2O2诱导HUVECs衰老的影响.结果:与H2O2组比较,HSPB1过表达可减轻H2O2诱导的HUVECs损伤,包括p16和p21 mRNA水平降低、SA-β-Gal活性及ROS水平显著降低(P<0.05或P<0.01).同时,HSPB1过表达可使p53、p16、p21、VCAM-1和ICAM-1蛋白水平显著降低(P<0.05或P<0.01).沉默SIRT1基因可逆转HSPB1对p16和p21 mRNA表达及组蛋白H2AX磷酸化的抑制作用(P<0.05或P<0.01).同时,沉默SIRT1基因导致HSPB1抑制SA-β-Gal活性作用也显著减弱(P<0.01).另外,SIRT1 siRNA逆转了HSPB1对p53、p21及p16蛋白表达的抑制作用(P<0.05或P<0.01).结论:小分子热休克蛋白HSPB1能够有效减轻H2O2诱导的HUVECs早衰,其机制与激活SIRT1信号通路,抑制氧化应激反应有关.

细胞早衰;HSPB1蛋白;SIRT1信号通路;氧化应激;血管内皮细胞

湖南省人民医院(湖南师范大学附属第一医院),湖南省急救医学研究所,急危重症代谢组学湖南省重点实验室,湖南长沙410005;湖南中医药大学临床医学院,湖南省脑科医院,湖南长沙410007;益阳市中心医院,耳鼻咽喉头颈外科,湖南益阳413099

[1]侯常苗;刘更盛;蒋宇;刘艳娟;邹联洪;陈芳;刘协红-.小分子热休克蛋白HSPB1通过上调SIRT1减轻H2O2诱导的人血管内皮细胞早衰)[J].中国病理生理杂志,2022(11):1929-1937

小分子热休克蛋白,H2O2+HSPB1

SIRT1,人血管内皮细胞,细胞早衰,hydrogen,peroxide,沉默信息调节因子,silent,information,regulator,规培,人脐静脉内皮细胞,human,umbilical,vein,endothelial,cells,HUVECs,空白对照,过表达,qPCR,p16,p21,衰老,老相,半乳糖,糖苷酶,senescence,associated,galactosidase,SA,Gal,活性检测,检测试剂盒,blot,p53,血管细胞黏附分子,vascular,adhesion,molecule,VCAM,细胞间黏附分子,intercellular,ICAM,流式细胞术,细胞内活性氧,reactive,oxygen,species,ROS,可减轻,平降,组蛋白,H2AX,磷酸化,siRNA,抑制氧化,氧化应激反应

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