典型文献
柑橘黄龙病菌分泌蛋白04580基因的克隆及原核表达
文献摘要：
为进一步了解柑橘黄龙病菌亚洲种CLas的致病机理,从Prasad预测的166种分泌蛋白中选取1个在柑橘植株中表达量较高的CLIBASIA–04580基因进行研究.提取感染柑橘黄龙病的柑橘叶片总DNA,经PCR扩增得到CLIBASIA–04580基因,切胶回收PCR产物,双酶切连接到pET–28α载体上,使用菌落PCR和限制性内切酶双酶切鉴定筛选阳性克隆;转化大肠杆菌BL21(DE3),用0.5、1.0、1.5、2.0 mmol/L的异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导重组蛋白表达融合组氨酸标签的CLIBASIA–04580重组蛋白,聚丙烯酰氨凝胶电泳(SDS–PAGE)检测重组蛋白的表达水平,再用蛋白纯化镍柱进行纯化.结果表明,携带组氨酸标签的CLIBASIA–04580重组蛋白得到表达,且异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)浓度为1.5 mmol/L时相对表达量达到峰值,通过SDS–PAGE凝胶分析,与未经过镍柱纯化的蛋白原液比较,可知纯化了CLIBASIA–04580重组蛋白.
文献关键词：
柑橘黄龙病菌;分泌蛋白;原核表达;蛋白纯化
中图分类号：
作者姓名：
邓杰夫;李魏;雷玲;洪艳云;刘双清;戴良英;易图永
作者机构：
湖南农业大学植物保护学院,湖南 长沙 410128;植物病虫害生物学与防控湖南省重点实验室,湖南 长沙 410128
文献出处：
引用格式：
[1]邓杰夫;李魏;雷玲;洪艳云;刘双清;戴良英;易图永-.柑橘黄龙病菌分泌蛋白04580基因的克隆及原核表达)[J].湖南农业大学学报（自然科学版）,2022(03):294-297
A类：
CLIBASIA
B类：
柑橘黄龙病菌,分泌蛋白,原核表达,CLas,致病机理,Prasad,植株,双酶,接到,pET,菌落,限制性内切酶,大肠杆菌,BL21,DE3,异丙基,半乳糖,糖苷,IPTG,重组蛋白表达,组氨酸,聚丙烯,凝胶电泳,SDS,PAGE,蛋白纯化,相对表达量,蛋白原,原液
AB值：
0.221588
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