典型文献
可变剪接体WNT4-β对山羊卵泡颗粒细胞增殖和激素分泌的影响
文献摘要:
旨在研究WNT4的一个可变剪接体(WNT4-β)对山羊卵泡颗粒细胞增殖的影响.本研究选取4~6月龄健康母羊20只,采集双侧卵巢,体外分离卵泡颗粒细胞进行培养.通过免疫荧光染色技术确定WNT4-β的表达位置;在山羊颗粒细胞中过表达或干扰WNT4-β后,利用RT-qPCR、Western blot检测WNT4-β和WNT信号通路中关键标记因子ROA1、RHOA及颗粒细胞增殖标记基因cyclin-D2、CDK4的表达变化;CCK-8技术检测颗粒细胞增殖情况;并通过ELISA分析颗粒细胞中生殖激素水平的变化.免疫荧光染色结果显示,WNT4-β只在山羊卵泡颗粒细胞中表达,在卵母细胞不表达;过表达WNT4-β后,WNT4-β和颗粒细胞增殖因子cyclin-D2、CDK4的mRNA相对表达量极显著增加(P<0.01),蛋白表达水平显著增加(P<0.05);WNT信号通路标记因子ROA1、RHOA mRNA表达水平显著增加(P<0.05),β-catenin蛋白表达水平显著增加(P<0.05);干扰WNT4-β后,WNT4-β、cyclin-D2、CDK4、ROA1 和 RHOA 的 mRNA 表达显著降低(P<0.05),WNT4-β、cyclin-D2、CDK4 及 β-catenin 蛋白表达显著降低(P<0.05).CCK-8结果显示,过表达WNT4-β促进颗粒细胞增殖(P<0.05);ELISA结果显示,过表达WNT4-β后,颗粒细胞中雌二醇(estradiol,E2)水平显著增加l(P<0.05),孕酮(progesterone,P4)水平升高但不显著(P>0.05);干扰WNT4-β后则结果相反,颗粒细胞增殖受到抑制(P<0.05),E2和P4的水平显著降低(P<0.05).综上所述,WNT4可变剪接体WNT4-β通过调控WNT信号通路促进山羊卵泡颗粒细胞增殖及类固醇激素分泌,本研究为解析WNT4调控山羊颗粒细胞增殖的潜在分子机制提供理论基础.
文献关键词:
山羊;卵泡发育;颗粒细胞增殖;可变剪接体;WNT4-β
中图分类号:
作者姓名:
王鹏;韩海银;李文韬;刘子嶷;储明星;刘玉芳
作者机构:
河北工程大学生命科学与食品工程学院,邯郸056021;中国农业科学院北京畜牧兽医研究所农业农村部动物遗传育种与繁殖重点实验室,北京100193
文献出处:
引用格式:
[1]王鹏;韩海银;李文韬;刘子嶷;储明星;刘玉芳-.可变剪接体WNT4-β对山羊卵泡颗粒细胞增殖和激素分泌的影响)[J].畜牧兽医学报,2022(10):3480-3489
A类:
ROA1
B类:
可变剪接体,WNT4,山羊,卵泡颗粒细胞,颗粒细胞增殖,激素分泌,月龄,母羊,外分,免疫荧光染色,荧光染色技术,过表达,qPCR,blot,RHOA,标记基因,cyclin,D2,CDK4,表达变化,CCK,生殖激素水平,染色结果,卵母细胞,相对表达量,蛋白表达水平,路标,catenin,雌二醇,estradiol,E2,孕酮,progesterone,P4,综上所述,进山,类固醇激素,卵泡发育
AB值:
0.161732
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