[目的]卵巢颗粒细胞的增殖和分化是原始卵泡生长启动的关键因素,卵巢颗粒细胞过度凋亡是卵泡闭锁的主要原因,因此卵巢颗粒细胞的功能对卵泡生长发育、排卵、激素分泌等至关重要.研究通过探究连环蛋白β1(catenin beta 1,CTNNB1)对猪卵泡发育过程中颗粒细胞的增殖、凋亡及类固醇激素分泌等功能的影响,为猪卵泡发育的分子调控机制研究提供参考.[方法]利用RNA抽提、实时定量PCR(Quantitative real time PCR,qRT-PCR)等方法,构建CTNNB1在母猪卵巢、肌肉、大脑等9个组织的表达谱;检测母猪性成熟过程中卵巢组织和小(≤3 mm)、中(3—6 mm)、大(≥6 mm)卵泡颗粒细胞中CTNNB1的表达情况.构建CTNNB1的真核表达载体及合成siRNA,转染至猪卵巢颗粒细胞,采用EdU、Annexin V-FITC/PI双染、ELISA等方法,检测CTNNB1对颗粒细胞增殖、凋亡、类固醇激素分泌的影响,以及对类固醇激素合成通路重要基因转录表达的影响.[结果]与肌肉、大脑等组织相比,CTNNB1在卵巢中mRNA表达水平最高.性成熟母猪卵巢中CTNNB1转录水平显著高于性成熟前和性成熟后的母猪;卵巢卵泡中CTNNB1转录和蛋白水平随卵泡发育明显上调;且卵巢颗粒细胞中CTNNB1转录和蛋白水平也随卵泡的发育逐渐上调.更重要的是,CTNNB1显著促进颗粒细胞增殖,抑制颗粒细胞凋亡;CTNNB1能够上调CYP1A1和HSD17B7的转录水平,下调CYP11A1、ESR1、ESR2、FSHR、LHR和NR5A1等类固醇激素合成相关基因的转录水平,进而促进颗粒细胞雌激素的分泌,抑制颗粒细胞雄激素和孕激素的分泌.[结论]本研究证实CTNNB1可能通过促进颗粒细胞增殖及雌激素的合成和分泌,抑制颗粒细胞凋亡及雄激素、孕激素的合成和分泌,进而促进卵泡的生长发育.

猪;卵巢;卵泡;颗粒细胞;CTNNB1

李丽莹;何颖婷;钟玉宜;周小枫;张豪;袁晓龙;李加琪;陈赞谋

华南农业大学动物科学学院/广东省农业动物基因组学与分子育种重点实验室/国家生猪种业工程技术研究中心,广州 510642

中国农业科学

[1]李丽莹;何颖婷;钟玉宜;周小枫;张豪;袁晓龙;李加琪;陈赞谋-.CTNNB1对猪卵巢颗粒细胞的调控)[J].中国农业科学,2022(15):3050-3061

HSD17B7

CTNNB1,卵巢颗粒细胞,细胞的增殖,卵泡闭锁,排卵,激素分泌,连环蛋白,catenin,beta,卵泡发育,类固醇激素,分子调控机制,抽提,实时定量,Quantitative,real,qRT,母猪,表达谱,性成熟,成熟过程,卵巢组织,卵泡颗粒细胞,真核表达载体,siRNA,转染,EdU,Annexin,FITC,颗粒细胞增殖,基因转录,转录表达,巢中,熟母,转录水平,颗粒细胞凋亡,CYP1A1,CYP11A1,ESR1,ESR2,FSHR,LHR,NR5A1,雌激素,雄激素,孕激素

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