[目的]探讨双氢睾酮(DHT)对小鼠颗粒细胞增殖与抗苗勒管激素(AMH)表达的影响.[方法]给3周龄的昆明小鼠注射孕马血清促性腺激素(PMSG,10 IU/只)以获取颗粒细胞,颗粒细胞传代后48 h HE染色鉴定形态,绘制颗粒细胞的生长曲线,免疫荧光法鉴定促卵泡素受体(FSHR)的表达.当第2代颗粒细胞汇合度达到50％时,先用无血清的DMEM/F12培养基饥饿处理12 h,然后在培养基中添加不同浓度的DHT(0、10-9、10-8、10-7、10-6、10-5 mol/L),培养48 h后检测颗粒细胞增殖情况,实时荧光定量PCR法及ELISA法分别测定AMH基因及蛋白的表达.在颗粒细胞培养液中分别添加10-6 mol/L Flutamide(雄激素受体(AR)特异性抑制剂)、10-7 mol/L DHT、10-7mol/L DHT+10-6 mol/L Flutamide、10-5 mol/L DHT、10-5 mol/L DHT+10-8 mol/L 11-ketodihydrotestosterone(AR特异性激动剂),分别记为F、D7、DF、D5、DK组,以不添加药物为对照组.培养48 h后,检测各组颗粒细胞增殖及AMH蛋白含量.[结果]体外培养的小鼠颗粒细胞呈梭形或铺路石状,生长曲线呈S形,细胞普遍表达FSHR;与0 mol/L DHT组相比,10-8、10-7 mol/L DHT组细胞增殖分别显著和极显著增加(P＜0.05;P＜0.01),10-5 mol/L DHT组细胞增殖显著降低(P＜0.05);10-7 mol/L DHT组AMH基因的相对表达量和AMH蛋白含量均极显著增加(P＜0.01).与D7组相比,DF组颗粒细胞增殖和AM H蛋白含量均极显著降低(P＜0.01);与D5组相比,DK组颗粒细胞增殖和AMH蛋白含量均极显著升高(P＜0.01).[结论]10-7 mol/L DHT能够显著促进颗粒细胞增殖和AMH表达,而10-5 mol/L显著降低了颗粒细胞增殖以及AMH表达,且AR介导了 DHT调控颗粒细胞增殖和AM H表达.

小鼠;颗粒细胞;双氢睾酮(DHT);雄激素受体(AR);抗缪勒管激素(AMH);细胞增殖

于凯;赵玉芬;翁钰;王琴;郝绍瑜;于泊洋;杜晨光;苏布登格日勒;李海军

内蒙古农业大学兽医学院,呼和浩特010018;内蒙古自治区基础兽医学重点实验室,呼和浩特010018;内蒙古医科大学基础医学院,呼和浩特010110

中国畜牧兽医

[1]于凯;赵玉芬;翁钰;王琴;郝绍瑜;于泊洋;杜晨光;苏布登格日勒;李海军-.双氢睾酮对小鼠卵泡颗粒细胞增殖与抗苗勒管激素表达的影响)[J].中国畜牧兽医,2022(08):3036-3043

Flutamide,DHT+10,ketodihydrotestosterone

双氢睾酮,卵泡颗粒细胞,颗粒细胞增殖,抗苗勒管激素,激素表达,AMH,周龄,昆明小鼠,促性腺激素,PMSG,IU,传代,HE,定形,生长曲线,免疫荧光法,促卵泡素受体,FSHR,汇合,先用,无血清,DMEM,F12,饥饿,细胞培养,培养液,雄激素受体,7mol,激动剂,别记,记为,D7,DF,D5,DK,加药,蛋白含量,体外培养,铺路石,石状,相对表达量,抗缪勒管激素

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