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草鱼TBK1基因荧光定量PCR检测方法的建立
文献摘要：
TANK结合激酶1(TANK-binding kinase 1,TBK1)基因在天然抗菌免疫中发挥重要作用,为研究该基因在草鱼(Ctenopharyngodon idella)抗病天然免疫中的表达水平,本研究根据已报道的草鱼TBK1基因(ciTBK1)序列,设计特异性引物2对,基于ciTBK1和18S rRNA双标准曲线建立了荧光定量PCR(Quantitative Real-time PCR,qRT-PCR)检测方法.结果表明,建立的标准曲线Ct(Cycle thrshold)值与模板浓度的对数呈现良好的线性关系(R2均大于0.99),建立的qRT-PCR检测方法能特异地定量检测ciTBK1基因,检测灵敏度可达50拷贝/μL,且组内及组间变异系数均小于5％.所建立的qRT-PCR检测方法具有良好的特异性、灵敏性和重复性.
文献关键词：
草鱼;TBK1基因;18S rRNA基因;荧光定量PCR;双标准曲线
中图分类号：
作者姓名：
张林;张浪;周剑光;甘金华;张涛;何力
作者机构：
中国水产科学研究院长江水产研究所,农业农村部淡水鱼类种质监督检验测试中心,湖北 武汉430072
文献出处：
引用格式：
[1]张林;张浪;周剑光;甘金华;张涛;何力-.草鱼TBK1基因荧光定量PCR检测方法的建立)[J].中国渔业质量与标准,2022(06):9-14
A类：
ciTBK1,双标准曲线,thrshold
B类：
草鱼,TANK,binding,kinase,抗菌免疫,Ctenopharyngodon,idella,天然免疫,究根,特异性引物,18S,rRNA,Quantitative,Real,qRT,Cycle,异地,定量检测,检测灵敏度,拷贝,组间变异,灵敏性
AB值：
0.285884
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