目的 探讨黄芪桂枝五物汤和四神煎治疗类风湿关节炎(RA)的可能作用机制.方法 首先采用网络药理学研究方法,收集RA疾病靶点和黄芪桂枝五物汤、四神煎中药成分靶点,并收集中药归经和证候信息.通过Cytoscape3.9.0软件构建"中药-成分-靶点-疾病"网络、中药-归经网络和中药-证候网络.基于STRING数据库构建蛋白质相互作用网络,进行KEGG通路富集分析.由"中药-成分-靶点-疾病"网络筛选关键化合物,蛋白相互作用网络筛选核心靶点,基于关键化合物和靶点进行分子对接.再进行细胞实验验证:采用10ng/ml白细胞介素1β(IL-1β)诱导成纤维样滑膜细胞(FLS)建立细胞炎症模型后,用不同浓度的黄芪桂枝五物汤及其拆方、四神煎及其拆方分别干预24h后,通过MTT实验和ELISA法检测细胞存活率和白细胞介素6(IL-6)水平.建立RAW264.7细胞炎症模型,经关键化合物分别干预24 h后,检测细胞上清中一氧化氮(NO)含量及细胞中P53基因表达.结果 药靶网络筛选得到黄芪桂枝五物汤和四神煎治疗RA的十种关键化合物包括槲皮素、山柰酚、异鼠李素、刺芒柄花素、没食子酸、儿茶素、花旗松素、木犀草素、黄芩素、汉黄芩素;据蛋白相互作用筛选得到核心靶点AKT1、PIK3CA、HRAS、NCOA1、TP53、STAT3、CCNA2;其中P53靶点与十种关键化合物亲和力较强.此外,富集分析结果表明,黄芪桂枝五物汤和四神煎通过调控PI3K-AKT、MAPK、JAK/STAT等多种信号通路发挥治疗作用.细胞实验表明,不同浓度黄芪桂枝五物汤、四神煎以及拆方均可抑制FLS细胞的炎性增殖和IL-6分泌(P＜0.01).除儿茶素外,其余关键化合物均可抑制RAW264.7细胞上清液NO分泌,且刺芒柄花素还可促进P53基因表达(P＜0.01).结论 黄芪桂枝五物汤配伍由桂枝、白芍协同辅助黄芪,作用于AKT1、PIK3CA、TP53等核心靶点调控PI3K-AKT、MAPK等信号通路发挥治疗RA的作用;四神煎以金银花、牛膝、石斛制约黄芪的温补之力,作用于AKT1、STAT3、TP53等核心靶点调控PI3K-AKT、JAK/STAT等信号通路发挥治疗RA的作用,而黄芪活性成分刺芒柄花素可能通过调节P53靶点治疗RA.

类风湿关节炎;黄芪;黄芪桂枝五物汤;四神煎;网络药理学;炎症因子;刺芒柄花素

马慧莱;侯宇芯;王爱成;刘海鑫;李青山;王任小

山西中医药大学,山西省晋中市榆次区大学街121号,030619;复旦大学药学院

中医杂志

[1]马慧莱;侯宇芯;王爱成;刘海鑫;李青山;王任小-.基于网络药理学比较黄芪桂枝五物汤和四神煎治疗类风湿关节炎的作用机制)[J].中医杂志,2022(20):1965-1974

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