该实验拟明确黄芪甲苷对心血管疾病最主要的致病因素血管紧张素Ⅱ(angiotensin Ⅱ,Ang Ⅱ)所诱发的血管内皮细胞介导的炎症反应的抑制作用,以及在该过程中钙离子(Ca2+)/phosphatidylinositol-3-kinase(PI3K)/protein kinase B(Akt)/血管内皮型一氧化氮合酶(endothelial nitric oxide synthase,eNOS)/一氧化氮(nitric oxide,NO)信号通路的作用.通过人脐静脉血管内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)培养模型,利用 ELISA ﹑cell-based ELISA,Western blot 及单核细胞黏附实验等方法,明确黄芪甲苷对Ang Ⅱ所诱发的炎症反应的抑制作用及相关机制.实验结果显示,黄芪甲苷明显增加HUVECs产生和释放NO,呈剂量和时间依赖性,并伴有eNOS蛋白的磷酸化(P＜0.05),黄芪甲苷所诱发的上述变化被特异性的一氧化氮合酶阻断剂NG-monomethyl-L-arginine(L-NMMA)﹑PI3K/Akt信号通路阻断剂LY294002或钙离子螯合剂ethylene glycol tetraacetic acid(EGTA)所阻断(P＜O.05).与正常对照组相比,Ang Ⅱ明显增加HUVECs产生和释放肿瘤坏死因子-α、白细胞介素-6、单核细胞趋化蛋白-1和黏附因子(细胞间黏附分子-1、血管细胞黏附分子-1),以及单核细胞黏附于血管内皮细胞的数量,并同时伴有磷酸化的核转录因子-κB抑制性因子α含量的增加及核转录因子-κB活性的升高(P＜0.05).针对Ang Ⅱ所诱发的炎症反应,黄芪甲苷具有明显的抑制作用(P＜0.05),而黄芪甲苷所诱发的抑制作用为L-NMMA﹑LY294002或EGTA所阻断(P＜0.05).因此,该实验结果表明黄芪甲苷通过激活Ca2+/PI3K/Akt/eNOS/NO信号通路抑制Ang Ⅱ所诱发的血管内皮细胞介导的炎症反应.

黄芪甲苷;血管紧张素Ⅱ;血管内皮细胞;炎症;NF-κB

张诗雨;孙阳;张静;李世杰;崔琳;谢世阳;高原;邢作英;王幼平

河南中医药大学第一附属医院中心实验室,河南郑州450000

中国中药杂志

[1]张诗雨;孙阳;张静;李世杰;崔琳;谢世阳;高原;邢作英;王幼平-.黄芪甲苷对angiotensin Ⅱ诱发的血管内皮细胞炎症反应的影响及机制研究)[J].中国中药杂志,2022(21):5900-5907

黄芪甲苷,angiotensin,细胞炎症,心血管疾病,致病因素,血管紧张素,Ang,钙离子,Ca2+,phosphatidylinositol,kinase,PI3K,protein,Akt,内皮型一氧化氮合酶,endothelial,nitric,oxide,synthase,eNOS,人脐静脉血管内皮细胞,human,umbilical,vein,cells,HUVECs,培养模型,blot,相关机制,时间依赖性,磷酸化,阻断剂,NG,monomethyl,arginine,NMMA,LY294002,离子螯合,螯合剂,ethylene,glycol,tetraacetic,acid,EGTA,正常对照,单核细胞趋化蛋白,黏附因子,细胞间黏附分子,血管细胞黏附分子,并同,核转录因子,抑制性

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