典型文献
基于LKB1-AMPK-TFEB的白术调节溶酶体自噬抗阿尔茨海默病作用机制
文献摘要：
淀粉样前体蛋白(amyloid precursor protein,APP)裂解后产生Aβ是阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)发生发展原因之一,该研究基于LKB1-AMPK-TFEB初步探讨白术(Atractylodes macrocephala,AM)降解APP抗AD作用机制.首先检测AM对AD转基因秀丽隐杆线虫CL2241记忆能力的影响,然后将APP质粒体外瞬转至小鼠神经瘤母细胞(N2a)中,设定空白对照组,APP组(模型组),阳性对照组(100 μmol·L-1雷帕霉素),AM低、中、高剂量组(100、200、300 μg·mL-1),ELISA法检测细胞培养基中Aβ1-42的分泌量;Western blot检测其对APP的降解作用,荧光显微镜分析APP荧光强度,荧光素酶报告基因法检测 TFEB(transcription factor EB)的转录活性,RLuc-LC3wt/RLuc-LC3G120A 检测溶酶体自噬活性,mRFP-GFP-LC3 检测自噬通量,Western blot 检测 TFEB、LC3 Ⅱ、LC3 Ⅰ、LAMP2、Beclin1、LKB1、p-AMPK、p-ACC 的蛋白表达量,免疫荧光检测 TFEB 的表达,RT-PCR法检测TFEB及下游靶基因的表达.结果显示AM可显著降低转基因线虫CL2241的趋化指数,不同浓度的AM降低细胞上清中Aβ的分泌量,AM剂量依赖性降解APP的蛋白表达量及APP的荧光强度,AM处理后TFEB转录活性增强,LC3双标质粒荧光强度均增强,RLuc-LC3wt/RLuc-LC3G120A的值也显著降低,不同浓度的AM均可以促进TFEB、LAMP2及Beclin1的蛋白水平,剂量依赖性的升高LC3Ⅱ/LC3 Ⅰ的蛋白表达量比值,免疫荧光结果显示,AM促进TFEB的荧光强度及人核表达,RT-PCR结果显示各浓度的AM可提高APP转染的N2a细胞中TFEB的mRNA水平,剂量依赖性地促进LAMP2的转录水平,且高浓度的AM还可以显著提高LC3、P62的mRNA水平,不同浓度的AM升高LKB1、p-AMPK及p-ACC的蛋白水平.综上所述.白术调节自噬降解APP的机制与激活LKB1-AMPK-TFEB通路有关.
文献关键词：
白术;溶酶体自噬;阿尔茨海默病;LKB1-AMPK-TFEB
中图分类号：
作者姓名：
吴丽敏;赵洁;张效威;李中华;王潘;孙意冉;张振强;谢治深
作者机构：
河南中医药大学中医药科学院,河南郑州450046;河南中医药大学药学院,河南郑州450046
文献出处：
引用格式：
[1]吴丽敏;赵洁;张效威;李中华;王潘;孙意冉;张振强;谢治深-.基于LKB1-AMPK-TFEB的白术调节溶酶体自噬抗阿尔茨海默病作用机制)[J].中国中药杂志,2022(17):4723-4732
A类：
溶酶体自噬,CL2241,RLuc,LC3wt,LC3G120A
B类：
LKB1,AMPK,TFEB,白术,抗阿尔茨海默病,淀粉样前体蛋白,amyloid,precursor,protein,Alzheimer,disease,AD,发展原因,Atractylodes,macrocephala,转基因,秀丽隐杆线虫,记忆能力,质粒,转至,神经瘤母细胞,N2a,空白对照,阳性对照,雷帕霉素,高剂量,细胞培养,分泌量,blot,降解作用,荧光显微镜,显微镜分析,荧光强度,荧光素酶报告基因,报告基因法,transcription,转录活性,mRFP,GFP,LAMP2,Beclin1,ACC,免疫荧光检测,靶基因,基因线,趋化,上清,剂量依赖,量依赖性,转染,转录水平,P62,综上所述,节自
AB值：
0.241331
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