目的:基于肝激酶B1(LKB1)/5'-磷酸腺苷激活的蛋白激酶(AMPK)信号通路探究金雀异黄酮对癫痫大鼠海马神经元凋亡和自噬的影响.方法:于腹腔内注射氯化锂与匹罗卡品诱导建立癫痫大鼠模型,随机分为5组(每组12只):模型组、金雀异黄酮低剂量组(7 mg·kg-1)、金雀异黄酮高剂量组(14 mg·kg-1)、金雀异黄酮(14 mg·kg-1)+空载(空载质粒)组、金雀异黄酮(14 mg·kg-1)+LKB1敲低(LKB1 siRNA质粒)组,另取12只Wistar大鼠,腹腔内注射等剂量生理盐水作为正常对照组,以金雀异黄酮和质粒分组给药干预后,检测各组大鼠癫痫评分及平均癫痫发作时间;以跳台实验检测各组大鼠学习记忆能力;以原位末端标记法(TUNEL)染色检测各组大鼠海马神经元凋亡率;以酶联免疫吸附测定(ELISA)试剂盒测量各组大鼠血清致炎因子环氧化酶-2(COX-2)、白细胞介素(IL)-1β、IL-17水平;以免疫印迹检测各组大鼠脑组织自噬、凋亡及LKB1/AMPK通路蛋白表达.结果:与正常对照组相比,模型组大鼠癫痫评分、平均癫痫发作时间、跳台实验犯错次数、海马神经元凋亡率、血清COX-2、IL-1β及IL-17水平、脑组织凋亡蛋白半胱氨酸蛋白酶-3(caspase-3)、B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)相关X蛋白(Bax)表达水平显著升高(P＜0.05),大鼠跳台实验潜伏期、脑组织自噬蛋白LC3-Ⅱ/LC3-I、P62 及 LKB1/AMPK通路蛋白p-AMPK/AMPK、LKB1表达水平显著降低(P＜0.05);与模型组相比,金雀异黄酮低、高剂量组大鼠癫痫评分、平均癫痫发作时间、跳台实验犯错次数、海马神经元凋亡率、血清COX-2、IL-1β及IL-17水平、脑组织凋亡蛋白caspase-3、Bax表达水平显著降低(P＜0.05),大鼠跳台实验潜伏期、脑组织自噬蛋白LC3-Ⅱ/LC3-I、P62及LKB1/AMPK通路蛋白p-AMPK/AMPK、LKB1表达水平显著升高(P＜0.05),且金雀异黄酮低、高剂量组间各指标差异均有统计学意义(P＜0.05);与金雀异黄酮高剂量组相比,金雀异黄酮+LKB1敲低组大鼠癫痫评分、平均癫痫发作时间、跳台实验犯错次数、海马神经元凋亡率、血清COX-2、IL-1β及IL-17 水平、脑组织凋亡蛋白caspase-3、Bax表达水平显著升高(P＜0.05),大鼠跳台实验潜伏期、脑组织自噬蛋白LC3-Ⅱ/LC3-I、P62及LKB1/AMPK通路蛋白p-AMPK/AMPK、LKB1表达水平显著降低(P＜0.05).结论:金雀异黄酮可通过激活LKB1/AMPK信号而减轻癫痫大鼠炎症,增强脑组织自噬,抑制大鼠海马神经元凋亡,提高其学习记忆能力,改善其癫痫症状.

金雀异黄酮;癫痫;肝激酶B1/5’-磷酸腺苷激活的蛋白激酶;海马神经元;凋亡;自噬

郑明慧;白建强

河北中石油中心医院儿科 河北廊坊065000;张家口市妇幼保健院儿三科

中国药师

[1]郑明慧;白建强-.基于LKB1/AMPK信号通路探究金雀异黄酮对癫痫大鼠海马神经元凋亡和自噬的影响)[J].中国药师,2022(11):1904-1910

+LKB1

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