典型文献
伯氏肩孔南极鱼dusp1基因在冷应激中的功能研究
文献摘要：
为了研究极地鱼类双特异性磷酸酶1(dual-specificity phosphatase 1,dusp1)基因在低温胁迫下的作用,实验采用RT-PCR技术从Trematomus bernacchii中克隆获得了编码区含有1128个核苷酸的dusp1同源基因,可编码376个氨基酸残基.将其通过同源重组的方法构建真核表达载体pcDNA3.1-dusp1并转染至人胚肾293T(HEK293T)细胞中,同时以pcDNA3.1空载质粒作为对照.使用荧光探针DCFH-DA检测了细胞活性氧(Reactive oxygen species assay,ROS)含量,采用流式细胞术检测了低温胁迫下细胞的存活率,采用Western Blot检测了P38/MAPK的磷酸化水平和RT-qPCR技术分析了半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(caspase-3)的mRNA表达水平.结果表明,伯氏肩孔南极鱼dusp1基因能在293T细胞中大量表达,并定位于细胞核;在低温胁迫下,与对照组相比,伯氏肩孔南极鱼dusp1基因的过表达能显著减少细胞ROS的含量和细胞凋亡率,并抑制促凋亡基因P38/MAPK的过度磷酸化和凋亡效应基因caspase-3的上调,减轻细胞在低温下的受损程度.研究表明伯氏肩孔南极鱼dusp1的过表达提高了293T细胞的抗寒能力,在细胞低温应激过程中具有保护功能.研究结果为探究极地鱼类低温适应性进化研究提供了新的证据,同时也为进一步探究冷胁迫下硬骨鱼类dusp1的功能奠定了基础.
文献关键词：
冷应激;双特异性磷酸酶1;P38/MAPK;伯氏肩孔南极鱼
中图分类号：
作者姓名：
王映;胡玲红;王化敏;陈良标
作者机构：
上海海洋大学国家海洋生物科学国际联合研究中心, 上海 201306;上海海洋大学水产种质资源发掘与利用教育部重点实验室, 上海 201306;上海海洋大学水产科学国家级实验教学示范中心, 上海 201306
文献出处：
引用格式：
[1]王映;胡玲红;王化敏;陈良标-.伯氏肩孔南极鱼dusp1基因在冷应激中的功能研究)[J].水生生物学报,2022(08):1105-1112
A类：
伯氏肩孔南极鱼,dusp1,Trematomus,bernacchii
B类：
冷应激,功能研究,极地,双特异性磷酸酶,dual,specificity,phosphatase,低温胁迫,编码区,同源基因,可编,氨基酸残基,同源重组,真核表达载体,pcDNA3,转染,人胚,胚肾,HEK293T,空载,质粒,荧光探针,DCFH,DA,细胞活性,Reactive,oxygen,species,assay,ROS,流式细胞术,Blot,P38,MAPK,磷酸化,qPCR,半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶,caspase,细胞核,过表达,细胞凋亡率,促凋亡,凋亡基因,抗寒能力,保护功能,低温适应性,适应性进化,冷胁迫,硬骨鱼类
AB值：
0.311925
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